高特異性免疫分子化磁性載體快速檢測(cè)病原菌的研究.pdf

1、金黃色葡萄球菌(Staphylococ cus.aureus)和 G 群鏈球菌(Group G Sreptococcus) 這兩種極具代表性的醫(yī)源性感染及群發(fā)性感染病原菌的快速檢測(cè)和分離是基于人IgG分子的Fc端分別與位于這兩種病原菌表面的金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)以及鏈球菌G蛋白(SPG)之間存在特異性親和反應(yīng)的原理進(jìn)行的。由于與SPA/SPG的結(jié)合位點(diǎn)是位于人IgG分子的Fc端而不是傳統(tǒng)意義上的免疫識(shí)別位點(diǎn)Fab端。因此抗體固定

2、化的標(biāo)準(zhǔn)與傳統(tǒng)免疫傳感器抗體固定化標(biāo)準(zhǔn)完全不同。在本研究中要求固定在載體——磁性微球表面人IgG分子的Fc 端能充分曝露出來(lái)，以便于SPA/SPG的接近與結(jié)合。與此相反，傳統(tǒng)的免疫傳感器則要求抗體固定在載體表面后其Fab端能易于抗原的接近與結(jié)合從而促進(jìn)抗原一抗體的免疫識(shí)別結(jié)合反應(yīng)?？傊?，對(duì)于傳統(tǒng)免疫傳感器來(lái)說(shuō)較差的抗體固定化方法反而能在對(duì)金黃色葡萄球菌和G群鏈球菌的檢測(cè)中取得更好的結(jié)果。 本文首先通過(guò)化學(xué)方法分別合成了三種具有不

3、同功能基團(tuán)的磁性微球 (magnetic beads，MB)。其中表面含有醛基的磁性微球粒徑為 10-20μm；表面含有IDA-Cu基團(tuán)的磁性微球粒徑為5-15μm；表面含有氨基的磁性微球粒徑為15-30 u m。紅外光譜分析不但證實(shí)了這三種磁性微球表面含有相應(yīng)的功能基團(tuán)，而且還包被有Fe<,3>O<,4>的核心使得合成的微球具有超順磁性。 將人IgG分子分別固定到具有三種不同功能基團(tuán)的磁性微球表面制備得到了能用于快速、簡(jiǎn)便地檢