GATA2與Smad4相互作用負調(diào)控TGFβ信號通路.pdf

1、GATA2是轉(zhuǎn)錄因子GATA家族成員，在造血干細胞/祖細胞中高表達，對造血干細胞的自我更新與分化具有重要調(diào)控作用。TGFβ信號通路是參與細胞增殖、分化、及腫瘤生成等多種生理病理學過程的重要信號通路。近年來研究發(fā)現(xiàn)TGFβ信號的下調(diào)在造血干細胞的自我更新過程發(fā)揮關(guān)鍵作用。本實驗室前期利用大規(guī)模酵母雙雜交篩選造血干細胞蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)，獲得GATA2的高可信度相互作用蛋白質(zhì)Smad4。Smad4是TGFβ信號通路的重要成員，可與其他Sma

2、d蛋白形成復(fù)合體調(diào)控下游靶基因的表達。
　　 本研究利用免疫共沉淀、GST-pulldown及共定位實驗證實GATA2與Smad4存在相互作用。利用報告基因?qū)嶒炞C實GATA2能夠特異地抑制Smad4及TGFβ誘導的信號通路活化，并進而抑制TGFβ下游靶基因PAI-1的表達，這種抑制作用需要GATA2蛋白質(zhì)的全長。對GATA2抑制作用的分子進行研究表明GATA2對Smad4的DNA結(jié)合活性無明顯影響。此外，雖然GATA2可募集HD