磷酸肌酸鈉對大鼠常溫體外循環(huán)腦保護研究.pdf

1、目的:本實驗通過建立常溫體外循環(huán)模型，觀察磷酸肌酸鈉對于體外循環(huán)腦損傷的腦保護作用，為進一步探討磷酸肌酸鈉的腦保護機制提供實驗基礎(chǔ)，并為臨床應用提供依據(jù)及更多客觀的參考指標。
　　方法：將18只成年雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分成三組，分別為假手術(shù)對照組（Sham組，n=6），磷酸肌酸鈉體外循環(huán)組（PCr組，n=6）,體外循環(huán)組（CPB組，n=6），三組大鼠采用10％水合氯醛，350mg·kg-1腹腔注射麻醉，經(jīng)口氣管

2、插管后接呼吸機進行機械通氣，經(jīng)右側(cè)上腔靜脈、右側(cè)頸內(nèi)動脈、股動脈、股靜脈穿刺置管，250U·kg-1肝素抗凝。PCr組及CPB組采用常溫（37±0.5℃）體外循環(huán)，總轉(zhuǎn)流時間為60min，經(jīng)右側(cè)上腔靜脈插管行右心房引流，右頸內(nèi)動脈作為血液灌注管，灌注流量為（120～150）mL·kg-1·min-1；Sham組除了不進行體外循環(huán)外，其余操作與 CPB組相同；PCr組在CPB組的基礎(chǔ)上，在預充液中加入磷酸肌酸鈉100mg/kg進行體外循環(huán)

3、；實驗過程中檢測體溫、動脈壓、動脈血氣。用ELISA法于體外循環(huán)前、CPB結(jié)束即刻、結(jié)束后20分鐘，采集血標本，檢測大鼠血清s-100β蛋白濃度,并于體外循環(huán)前、CPB結(jié)束即刻、結(jié)束后2h測特異性神經(jīng)元烯醇化酶NSE酶濃度水平。CPB結(jié)束后6h時心臟灌注4%多聚甲醛固定，取腦組織標本，通過光學顯微鏡觀察大腦海馬組織超微結(jié)構(gòu)變化。
　　結(jié)果：CPB組和Pcr組轉(zhuǎn)流中平均動脈壓、心率、體重無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。海馬HE染色顯示

4、：Sham組細胞數(shù)量、形態(tài)及結(jié)構(gòu)正常，核仁清楚，未見明顯病理異常；與Sham組比較，CPB組大鼠大腦皮層細胞核核膜模糊，核內(nèi)異染色質(zhì)邊集凝聚，細胞器有減少，出現(xiàn)空泡化，細胞間緊密連接相對松散；Pcr組大鼠海馬組織超微結(jié)構(gòu)的病理改變較CPB組明顯減輕，與Sham組比較，PCr組中的神經(jīng)細胞凋亡增多。S-100β蛋白濃度大鼠組內(nèi)比較：Sham組三個時間點的蛋白濃度幾乎沒有變化，P＞0.05，也證明此組蛋白濃度沒有統(tǒng)計學意義；PCr組同CPB

5、組術(shù)后較術(shù)前濃度明顯升高，且p＜0.05，說明CPB過程造成了S-100β升高。大鼠組間比較：術(shù)前三組蛋白濃度兩兩比較，P＞0.05，說明術(shù)前各組S-100β無差別。術(shù)后即刻同術(shù)后20分鐘，PCr組與CPB組的蛋白濃度與Sham組比較，蛋白濃度明顯升高，但PCr組的蛋白濃度升高程度低于CPB組，說明PCr有減輕腦損傷的作用。NSE酶濃度大鼠組內(nèi)比較：Sham組三個時間點的酶濃度幾乎沒有變化，P＞0.05，也證明此組蛋白濃度沒有統(tǒng)計學意義

6、；PCr組同CPB組術(shù)后較術(shù)前濃度明顯升高，且p＜0.05，說明CPB造成了腦損傷，術(shù)后兩個時間點的酶濃度p＜0.05，說明術(shù)后兩個時間點的酶濃度的變化沒有改變。大鼠組間比較：術(shù)前三組酶濃度兩兩比較，P＞0.05，無統(tǒng)計學意義，術(shù)后即刻同術(shù)后20分鐘測得的蛋白濃度各時間點兩兩比較，P＜0.05，說明CPB造成了腦損傷，而PCr能減輕腦損傷。
　　結(jié)論：
　　1、體外循環(huán)可以導致大鼠的S-100β蛋白及NSE表達增加；