骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與軟骨細(xì)胞共同培養(yǎng)復(fù)合可注射性改良纖維蛋白凝膠支架修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討以骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)與軟骨細(xì)胞按3∶1比例共同培養(yǎng)作為種子細(xì)胞，復(fù)合改良纖維蛋白凝膠支架，在成年兔體內(nèi)誘導(dǎo)形成軟骨，修復(fù)軟骨缺損的可能性。
　　方法:過量麻醉處死1周大的日本大耳兔，以全骨髓貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)BMSCs;Ⅱ型膠原蛋白酶消化分離幼兔膝、肘關(guān)節(jié)末端軟骨細(xì)胞。取第3代BMSCs和第1代關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，按3∶1的細(xì)胞密度混合后與改良纖維蛋白凝膠支架復(fù)合。取48只成年日本大耳兔，用電鉆在雙側(cè)膝關(guān)節(jié)的股骨滑

2、車中間制造直徑5mm、深4mm的全層軟骨缺損模型，將48只日本大耳兔隨機(jī)分為三組:實(shí)驗(yàn)組，缺損處注入改良纖維蛋白凝膠與種子細(xì)胞復(fù)合物;對照組，缺損處注入改良纖維蛋白凝膠;空白組，缺損曠置。分別在術(shù)后6周、12周取材，從大體觀察、Wakitani評分、組織學(xué)觀察（HE染色）、免疫組化、蛋白聚糖(GAG)含量檢測等方面評估關(guān)節(jié)軟骨缺損的修復(fù)情況。
　　結(jié)果:大體觀察及組織學(xué)觀察:實(shí)驗(yàn)組12周后缺損處已被新生修復(fù)組織覆蓋，修復(fù)組織類似關(guān)

3、節(jié)軟骨，以透明軟骨為主，與缺損周圍軟骨組織邊界模糊不清;對照組的修復(fù)組織不能完全修復(fù)軟骨缺損，透明軟骨含量較少，與缺損周圍軟骨組織邊界較清楚;空白組修復(fù)效果不佳，以疤痕組織修復(fù)為主。
　　結(jié)論:1、改良纖維蛋白凝膠支架生物相容性好，降解速率適宜，不引起機(jī)體產(chǎn)生炎性反應(yīng)，軟骨細(xì)胞在其中能夠正常增殖和分泌基質(zhì)，是作為可注射性細(xì)胞支架較為理想的選擇。2、以第3代BMSCs與第1代軟骨細(xì)胞、改良纖維蛋白膠構(gòu)建的細(xì)胞支架復(fù)合物可以通過注射的