自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞-Ⅰ-Ⅲ型膠原膜復(fù)合物修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 探討自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)聯(lián)合Ⅱ/Ⅲ型膠原膜修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損方法的可行性。
　　 方法：
　　 該實驗于2010-8/2011-10在山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院骨與軟組織損傷與修復(fù)實驗室完成。
　　 (l)體外分離、培養(yǎng)、擴增12只2月齡新西蘭大白兔的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，選第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進行形態(tài)學(xué)觀察。

2、r>　　 (2)構(gòu)建骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞—Ⅰ/Ⅲ型膠原膜復(fù)合物，并進行相關(guān)組織學(xué)及生物學(xué)性狀研究。
　　 (3)新西蘭大白兔24只分為2組，制作雙膝股骨滑車直徑3.8mm、深2mm的關(guān)節(jié)軟骨缺損模型，其中A組（移植組）12只新西蘭大白兔將植入自體骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞—Ⅰ/Ⅲ型膠原膜復(fù)合物，B組（對照組）12只植入單純Ⅰ/Ⅲ型膠原膜。分別于術(shù)后8、12周處死動物，觀察大體標(biāo)本、組織學(xué)染色（HE染色、蕃紅O染色）、Ⅱ型膠原免疫組化，并采用

3、O'Driscoll，Keeley and Salter評分標(biāo)準(zhǔn)對修復(fù)組織進行評分，統(tǒng)計軟件SPSS13.0進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果：
　　 (l)第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞鏡下觀察：BMSCs生長形態(tài)良好，呈梭形，有細(xì)胞漩渦形成，行組織學(xué)染色：細(xì)胞在玻片上貼附良好，排列規(guī)律，呈復(fù)層排列，細(xì)胞形態(tài)典型。
　　 (2)經(jīng)體外培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能很好地貼附于膠原膜的粗糙面。
　　 (3)在體內(nèi)實驗中：行組

4、織學(xué)染色示：A組（移植組）的缺損修復(fù)8周時為類透明軟骨修復(fù)，12周時接近于正常軟骨。B組（對照組）8周時以纖維樣組織修復(fù)為主，12周時為纖維軟骨修復(fù)。
　　 (4)組織學(xué)評分統(tǒng)計結(jié)果表明：12周比8周評分高，兩組差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜O.001)，同樣移植組與對照組在各自時間點上相比也有顯著差異(P＜O.001)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)第3代的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長狀況良好，細(xì)胞形態(tài)單一，典型，可作為組織