miR-335-5p對高糖狀態(tài)下成骨細胞功能的影響.pdf

1、目的：觀察miR-335-5p對高糖狀態(tài)下成骨細胞增殖、凋亡的影響并探討其可能分子機制。
　　方法：用不同濃度葡萄糖培養(yǎng) MC3T3-E1成骨細胞，并分為正常對照組（葡萄糖濃度5.5mmol/L）、高糖組(葡萄糖濃度22.0mmol/L)、agomir-335-5p組(轉(zhuǎn)染agomir-335-5p，與濃度為22.0mmol/L的葡萄糖共培養(yǎng))及agomir NC組(轉(zhuǎn)染agomir陰性對照，與濃度為22.0mmol/L的葡萄糖共

2、培養(yǎng))。培養(yǎng)7天后，采用MTT比色分析法測定細胞增殖率，流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率，qRT-PCR檢測細胞miR-335-5p與DKK1 mRNA的表達，Western Blot檢測DKK1及caspase-3的蛋白表達水平。
　　結(jié)果：
　　(1)高糖組MC3T3-E1成骨細胞miR-335-5p的表達水平較正常對照組顯著下調(diào)，agomir-335-5p組MC3T3-E1成骨細胞miR-335-5p的表達水平較高糖組與ago

3、mir NC組均明顯上調(diào)（P<0.05），而DKK1的mRNA表達水平在各組之間無顯著差異。
　　(2)與正常對照組相比，高糖組MC3T3-E1成骨細胞的增殖率明顯降低，凋亡率顯著增加，而與高糖組比較，agomir-335-5p組MC3T3-E1成骨細胞的增殖率明顯增加，凋亡率顯著降低（P<0.05）。
　　(3)高糖組MC3T3-E1成骨細胞DKK1和caspase-3的蛋白表達水平均顯著高于正常對照組，而agomir-3