種植體周圍炎條件下成骨細(xì)胞增殖分化功能研究.pdf

1、種植體周圍炎是口腔種植中常見的并發(fā)癥,是一種通常發(fā)生在正常行使功能的骨性結(jié)合種植體周圍組織的慢性進(jìn)展性邊緣炎癥,可以導(dǎo)致種植體周圍支撐骨組織的功能喪失。研究顯示,種植體周圍炎是導(dǎo)致種植體松動(dòng)失敗的重要原因之一。
　　成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化,在種植體骨結(jié)合中起到重要的作用?，F(xiàn)有文獻(xiàn)認(rèn)為,種植體周圍炎發(fā)生時(shí),炎癥因子影響了成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞的平衡狀態(tài),導(dǎo)致種植體松動(dòng)失敗。
　　本實(shí)驗(yàn)采用炎癥

2、微環(huán)境條件下的頜骨成骨細(xì)胞,觀察炎癥微環(huán)境條件下的頜骨成骨細(xì)胞增殖分化能力等生物學(xué)功能,并比對正常條件下頜骨成骨細(xì)胞增殖分化能力,了解種植體周圍炎的炎癥微環(huán)境對頜骨成骨細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。為研究種植體周圍炎造成骨吸收之后如何恢復(fù)骨結(jié)合提供理論依據(jù)。
　　第一部分：種植體周圍炎齦溝液與正常牙齦溝液中炎癥細(xì)胞因子與活性酶測定
　　目的:從臨床上收集病例,測定種植體種植體周圍炎齦溝液與正常牙齦溝液中炎癥細(xì)胞因子與活性酶水平。

3、r>　　方法:從臨床上收集因種植體周圍炎導(dǎo)致種植失敗,種植體需要拔除的種植體周圍炎病人和接受第三磨牙拔除術(shù)的患者,檢測相應(yīng)齦溝液中的炎癥細(xì)胞因子及酶活性水平。
　　結(jié)果:發(fā)生種植體周圍炎的牙位周圍齦溝液TNF-α、IL-6、ALP和AST的水平高于健康天然牙周圍齦溝液。
　　結(jié)論:TNF-α、IL-6、ALP和AST可以作為評價(jià)種植牙周圍感染與炎癥情況的重要指標(biāo)。
　　第二部分：炎癥組織及正常組織來源成骨細(xì)胞的鑒定與增

4、殖能力的比較
　　目的:分離、培養(yǎng)、純化炎癥組織及正常組織來源的成骨細(xì)胞,并對這兩種來源的成骨細(xì)胞的增殖能力進(jìn)行比較。采用堿性磷酸酶及茜素紅染色對其進(jìn)行鑒定。
　　方法:從臨床上收集因種植體周圍炎導(dǎo)致種植失敗,種植體需要拔除的種植體周圍骨組織和接受第三磨牙拔除術(shù)的患者第三磨牙周圍骨組織。采用改良后的組織塊法,分離培養(yǎng)炎癥組織來源的成骨細(xì)胞和正常組織來源的成骨細(xì)胞,采用反復(fù)貼壁法對其進(jìn)行純化。采用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測其增殖能

5、力,使用堿性磷酸酶試劑盒及茜素紅染色對純化后的成骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定。
　　結(jié)果:得到了純化后的炎癥組織來源成骨細(xì)胞和正常組織來源的成骨細(xì)胞,堿性磷酸酶及茜素紅染色鑒定結(jié)果顯示陽性。噻唑藍(lán)(MTT)法檢測結(jié)果顯示炎癥組織來源的成骨細(xì)胞的細(xì)胞增殖活力顯著低于正常組織來源的成骨細(xì)胞。
　　結(jié)論:改良后的組織塊法和反復(fù)差速貼壁法能夠得到純化的炎癥組織來源的成骨細(xì)胞和正常組織來源的成骨細(xì)胞。種植體周圍炎的炎癥微環(huán)境降低了成骨細(xì)胞的增殖能力

6、
　　第三部分：種植體周圍炎的炎癥微環(huán)境對頜骨成骨細(xì)胞分化能力的影響
　　目的:鑒定來自于種植體周圍炎炎癥組織和正常組織的成骨細(xì)胞的分化能力。
　　方法:采用RT-PCR技術(shù)檢測兩種不同組織來源成骨細(xì)胞OCN,Runx2,Col-1的表達(dá)。Western Blots檢測兩種不同組織來源成骨細(xì)胞OCN的表達(dá)。
　　結(jié)果:RT-PCR結(jié)果顯示炎癥組織來源的成骨細(xì)胞的OCN,Runx2,Col-1等相關(guān)基因的表達(dá)明顯低