脂肪酶產(chǎn)生菌的篩選、鑒定及脫墨的初步研究.pdf

1、生物酶脫墨是當(dāng)今國內(nèi)外廢紙回用研究的熱點(diǎn)之一。已有的研究報(bào)道證明脂肪酶在生物脫墨過程中具有重要的作用。在脫墨過程中，脂肪酶主要是以分解油墨與纖維表面的連接料的方式釋放出油墨粒子，對纖維強(qiáng)度和紙漿得率的影響較小，因此在生物脫墨的過程中有較大的應(yīng)用潛力。 為了能篩選到對油墨連接料有專一性降解作用的脂肪酶產(chǎn)生菌，本研究從印刷廠車間、排水渠內(nèi)采集被油墨污染較嚴(yán)重的土樣和水樣，分離篩選到一株具有較高脂肪酶活性、能利用礦物油為唯一碳源，并

2、分解油墨連接料的菌株LP502。經(jīng)菌體形態(tài)、菌落特征觀察，生理生化測定，16S rRNA基因以及gyrB基因全序列分析，初步鑒定該菌為乙酸鈣不動桿菌(Acinitobacter，calcoaceticus)：通過酯酶特異性活性染色研究表明，該酶對脂肪酶底物有專一性催化作用，由兩個同功酶構(gòu)成；對該酶發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，最適培養(yǎng)基為：K<,2>HPO<,4>0.1％，(NH<,4>)<,2>SO<,4>0.1％，蛋白胨3％，MgSO<,4>

3、7H<,2>O 0.1％，礦物油0.5％，蔗糖1％，牛肉膏1％；最佳培養(yǎng)條件為：起始pH7.0，20 mL裝液量，30℃，發(fā)酵時間72 h；酶活力達(dá)到25000U/L。利用該酶對廢舊新聞紙進(jìn)行生物脫墨的試驗(yàn)研究，并經(jīng)過浮選、抄片，制成的再生紙自度值為224，9513，與未經(jīng)脫墨的再生紙相比，二者白度值相差42.5315，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該結(jié)果表明Acinitobacter，calcoaceticus LP502所產(chǎn)脂肪酶能夠有效地脫除油