小鼠過敏性休克后MCT、ECP的時空變化規(guī)律及肥大細胞脫顆粒觀察.pdf

1、本文研究目的：建立小鼠過敏性休克模型，探討小鼠過敏性休克后咽喉、肺、胃組織中類胰蛋白酶(MCT)和嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)的時間變化規(guī)律，旨為臨床及法醫(yī)學(xué)診斷過敏性休克提供科學(xué)、客觀的參考依據(jù)。 研究方法： (1)50只小鼠隨機分為對照組和致敏組。對照組10只，致敏組40只。致敏組于實驗第1天腹腔注射致敏原OVA(卵蛋白)，1周后加強注射一次。免疫后第3周，尾靜脈注射OVA，誘發(fā)過敏性休克。致敏組小鼠在尾靜脈注射致敏原前

2、腹腔注射Hanks液，1h后頸椎脫臼處死，吸取腹腔液，制成肥大細胞懸液。取1滴于載玻片上，中性紅染色。顯微鏡下隨機計數(shù)100個細胞，計算脫顆粒肥大細胞百分比。(2)另取小鼠50只，致敏組小鼠分別于致敏后30mm、1h、6h、24h頸椎脫臼處死，取咽喉、肺、胃組織，經(jīng)4％多聚甲醛固定、15％蔗糖脫水后冰凍切片。采用組織原位雜交方法和Image-Pro Plus5.0圖像分析系統(tǒng)檢測MCT與ECP的含量，用SPSS10.0軟件進行單因素方差

3、分析。 研究結(jié)果： (1)致敏組小鼠均出現(xiàn)過敏性休克的典型臨床表現(xiàn)及體征，100％發(fā)生過敏性休克，死亡率為22.5％：肥大細胞脫顆粒百分比明顯高于對照組。(2)致敏后小鼠咽喉、肺、胃組織MCT與ECPmRNA平均光密度均高于正常對照組。咽喉、肺、胃MCTmRNA在致敏后30mm達到高峰，隨后逐漸下降，24h后仍高于正常水平；咽喉ECPmRNA在致敏后30min升高，隨后保持高水平；肺組織ECPmRNA在致敏后6h其表達突然增高并