新生牛腦活性肽NBBP-1誘導人神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH細胞凋亡作用與機理研究.pdf

1、采用酸抽提、離子交換、凝膠柱層析等方法，從新生小公牛腦內分離提取到新生牛腦活性肽NBBP-1，處理人神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH細胞，觀察鑒定NBBP-1對人神經(jīng)母細胞瘤細胞的生物學效應，并初步探索其對神經(jīng)母細胞瘤SK-N-H細胞的作用機理。 實驗結果表明，NBBP-1能有效抑制SK-N-SH細胞增殖活動，其細胞生長抑制率達88.84％。流式細胞儀檢測SK-N-SH細胞經(jīng)NBBP-1處理后，亞G1期細胞增多，出現(xiàn)G0/G1期阻滯

2、；DNA電泳實驗顯示DNA降解成小片段，細胞進入凋亡。光鏡、電鏡觀察顯示經(jīng)處理后的SK-N-SH細胞趨于固縮狀態(tài)，細胞體積減小，核膜崩解，細胞核出現(xiàn)斷裂現(xiàn)象形成核殘體，異染色質增多且多為凝聚狀態(tài)，細胞質空泡化明顯，出現(xiàn)凋亡小體等典型的細胞凋亡形態(tài)和超微結構特征。免疫細胞化學觀察顯示，NBBP-1處理后的SK-N-SH細胞，與細胞凋亡相關的癌基因bcl-2表達下調，抑癌基因p53、fas、bax等表達上調。 研究結果表明，新生牛