輪狀病毒腹瀉嬰兒腸道微生態(tài)變化的研究.pdf

1、輪狀病毒(rotavirus，RV)感染腹瀉是引起世界范圍內(nèi)嬰幼兒重癥腹瀉的主要原因，在發(fā)展中國(guó)家每年有60萬(wàn)嬰幼兒由于RV感染腹瀉引起脫水，甚至死亡。該疾病對(duì)嬰幼兒的健康，生長(zhǎng)發(fā)育乃至生命都造成嚴(yán)重影響。RV引起腹瀉是通過(guò)擾亂腸道黏膜細(xì)胞的吸收，使得腸道微生態(tài)平衡失調(diào)，腸道功能發(fā)生紊亂而造成的。腹瀉導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，而菌群失調(diào)又誘發(fā)或加重腹瀉。因此理清腹瀉時(shí)腸道菌群狀況對(duì)預(yù)防和治療RV感染腹瀉意義深遠(yuǎn)。本研究通過(guò)對(duì)嬰兒糞便中微生物的分

2、析探討了RV病毒感染腹瀉嬰兒腸道微生態(tài)的變化，揭示了腸道微生態(tài)在嬰兒RV感染腹瀉疾病中的作用。
　　 本試驗(yàn)以2011年1-3月間哈爾濱市兒童醫(yī)院確診的15例RV感染腹瀉嬰兒（RV腹瀉組）和15例健康嬰兒（對(duì)照組）為研究對(duì)象，利用試劑盒法提取嬰兒糞便DNA，利用調(diào)查問(wèn)卷方式收集嬰兒生長(zhǎng)發(fā)育和患病情況信息，采用細(xì)菌的16S rDNA V3區(qū)通用引物、乳酸桿菌屬專一性引物和雙歧桿菌屬專一性引物對(duì)糞便總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)

3、行變性梯度凝膠電泳(DGGE)分析，利用Quantity One軟件對(duì)RV感染腹瀉嬰兒的腸道菌群進(jìn)行聚類和相似性分析，利用Shannon-Weaver指數(shù)對(duì)腸道菌群進(jìn)行生物多樣性分析，利用基因測(cè)序技術(shù)和Quantity One軟件對(duì)RV感染腹瀉嬰兒腸道微生物進(jìn)行定性和定量分析。
　　 研究結(jié)果表明:RV腹瀉組和對(duì)照組的腸道優(yōu)勢(shì)菌群多樣性存在明顯差異(P＜0.05)，且RV腹瀉組的多樣性低于對(duì)照組，表明RV腹瀉對(duì)腸道菌群多樣性存在

4、一定影響。RV腹瀉嬰兒腸道中擬桿菌屬、梭菌屬、腸桿菌屬、屎腸球菌和大腸桿菌屬占優(yōu)勢(shì)。與對(duì)照組比，乳酸菌屬、雙歧桿菌屬和消化球菌屬在RV感染腹瀉嬰兒的腸道中不占優(yōu)勢(shì)，說(shuō)明RV感染腹瀉后嬰兒腸道優(yōu)勢(shì)菌群的組成發(fā)生變化。
　　 RV腹瀉組和對(duì)照組腸道乳酸桿菌屬的多樣性存在明顯差異(P＜0.05)，且RV腹瀉組的多樣性低于對(duì)照組，表明RV腹瀉對(duì)乳酸桿菌屬的多樣性存在一定影響。RV腹瀉組乳酸桿菌屬的組成為:短乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和發(fā)酵乳

5、酸桿菌。和對(duì)照組相比，嗜熱乳酸桿菌和植物乳酸桿菌不是RV腹瀉組腸道乳酸桿菌屬的優(yōu)勢(shì)種，說(shuō)明RV感染腹瀉后嬰兒腸道菌種乳酸桿菌屬的組成發(fā)生了變化。
　　 RV腹瀉組和對(duì)照組腸道雙歧桿菌屬的多樣性存在明顯差異(P＜0.05)，且RV腹瀉組的多樣性低于對(duì)照組，表明RV腹瀉對(duì)雙歧桿菌屬的多樣性存在一定影響。RV腹瀉組雙歧桿菌屬的組成為:短雙歧桿菌和青春雙歧桿菌。和對(duì)照組相比，嬰兒雙歧桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌和短雙歧桿菌不是RV腹瀉組腸道雙歧桿菌