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1、目的:通過應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM)檢測(cè)2型糖尿病(type2 diabetes mellitus,T2DM)無并發(fā)癥患者組(DM組)、2型糖尿病單純并發(fā)糖尿病周圍神經(jīng)病變(diabetic peripheral neuropathy,DPN)患者組(DPN組)和正常人群對(duì)照組(NC組)的血小板膜糖蛋白(glycoprotein,GP)。即檢測(cè)能反映血小板活化程度、可以預(yù)測(cè)微循環(huán)血栓形成風(fēng)險(xiǎn)的血小板膜GP:
2、CD41、CD36、CD63、CD62P的陽性表達(dá)情況,分析比較三組人群中四種血小板膜GP的陽性表達(dá)的差異性,預(yù)測(cè)血小板黏附聚集,終致DPN,為DPN的預(yù)防和治療提供更多依據(jù)。
方法:選擇我院2014-1-1至2014-12-31期間健康體檢人群50例作為NC組,同期住院的2型糖尿病無并發(fā)癥患者50例為DM組、2型糖尿病單純并發(fā)糖尿病周圍神經(jīng)病變患者50例為DPN組。用FCM測(cè)定上述三組人群血小板膜GP: CD41、CD36、
3、CD63、CD62P的陽性表達(dá)水平;同時(shí)利用多倫多臨床評(píng)分系統(tǒng)(TCSS)評(píng)分表評(píng)定DPN程度;測(cè)定血脂、肝腎功能、尿微量白蛋白(mALB)、纖維蛋白原(FIB)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、血小板體積分布寬度(PDW)、平均血小板體積(MPV)、大血小板比率(P-LCR)、空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c);所有糖尿病患者均行神經(jīng)電生理檢查,即用肌電圖儀測(cè)定雙側(cè)正中神經(jīng)、尺神經(jīng)、脛神經(jīng)、腓腸神經(jīng)、腓總神經(jīng)的感覺及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)。本
4、研究所測(cè)數(shù)據(jù)以(X)±S表示,均進(jìn)行正態(tài)性、方差齊性檢驗(yàn),組間差異應(yīng)用SPSS13.0版軟件進(jìn)行單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1血小板膜GP在NC組、DM組、DPN組各組的陽性表達(dá)率:
1.1血小板膜GPCD41在各組的陽性表達(dá)率分別為:97.44±3.40%、97.16±2.45%、97.17±3.16%,在三組間的陽性表達(dá)率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05, F=0.137。
5、> 1.2血小板膜GPCD36在各組間的陽性表達(dá)率分別為:92.35±4.52%、94.08±3.87%、95.43±1.73%,三組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05,F(xiàn)=9.308。 NC組與DM組、NC組與DPN組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05;DM組與DPN組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05。
1.3血小板膜GP CD63在各組間的陽性表達(dá)率分別為:2.61±0.90%、4.24±2.91%、7.65±3.79%,三組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)
6、差異,P<0.05,F(xiàn)=42.073。NC組與DM組、NC組與DPN組、DM組與DPN組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05。
1.4血小板膜GP CD62P在各組間的陽性表達(dá)率分別為:1.70±0.84%、3.31±2.27%、6.92±3.60%,三組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05,F(xiàn)=57.107。NC組與DM組、NC組與DPN組、DM組與DPN組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05。
綜上所述1)CD41的陽性表達(dá)率在DM
7、組、DPN組、NC組間無差異。2)CD36、CD63、CD62P的陽性表達(dá)率在三組間有差異,DM組、DPN組均高于NC組。3)CD36的陽性表達(dá)率在DM組與DPN組間無差異。4)CD63與CD62P的陽性表達(dá)率在DM組與DPN組間有差異,DPN組高于DM組。
2血小板各指標(biāo)在NC組、DM組、DPN組三組間的表達(dá)分別為:
2.1 PLT(×109/L):233.78±51.06、227.84±49.17、235.60±
8、62.74,三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,F(xiàn)=0.276。
2.2 PDW:10.97±1.23、10.90±0.93、10.66±0.99,三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,F(xiàn)=1.202。NC組與DM組、NC組與DPN組、DM組與DPN組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05。
2.3 MPV(fL):12.25±2.10、12.97±1.66、12.35±1.83,三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,F(xiàn)=2.191。
9、NC組與DM組、NC組與DPN組、DM組與DPN組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05。
2.4 P-LCR(%):28.71±7.00、31.48±6.81、28.44±7.28,三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,F(xiàn)=2.855。NC組與DM組、NC組與DPN組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05; DM組與DPN組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05。
3 FIB(g/L)在NC組、DM組、DPN組間指標(biāo)分為:2.88±0.39、3
10、.05±0.66、3.16±0.87,三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,F(xiàn)=2.146。NC組與DM組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05; NC組與DPN組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05;而DM組與DPN組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P>0.05。
4 DPN組各血小板膜糖蛋白陽性表達(dá)率與BMI、病程、HBA1C、SBP、DBP、TC、TG、HDL-C、LDL-C、PLT、PDW、MPV、P-LCR、FIB的相關(guān)分析顯示,CD62P與BMI正相關(guān)
11、(r=0.341,P<0.05),與PDW顯著正相關(guān)(r=0.381,P<0.05),與MPV正相關(guān)(r=0.318,P<0.05),與P-LCR正相關(guān)(r=0.317,P<0.05),與CD63顯著正相關(guān)(r=0.474,P<0.05)。
結(jié)論:
1 DM組與DPN組患者血小板膜GP: CD36、CD63、CD62P的陽性表達(dá)率較NC組增高,提示2型糖尿病及2在糖尿病周圍神經(jīng)病變患者血小板處于活化狀態(tài),血小板黏附、
12、聚集、血栓形成風(fēng)險(xiǎn)增加。
2血小板膜GPCD41不能預(yù)測(cè)血小板活化、血栓形成風(fēng)險(xiǎn)及DPN風(fēng)險(xiǎn);CD36亦不能作為預(yù)測(cè)2型糖尿病患者發(fā)生糖尿病周圍神經(jīng)病變的風(fēng)險(xiǎn);CD63、CD62P提示糖尿病周圍神經(jīng)病變患者血小板活化較2型糖尿病患者增強(qiáng),血小板黏附、聚集、血栓形成風(fēng)險(xiǎn)是大大增加的。
3傳統(tǒng)使用的觀測(cè)血小板功能的指標(biāo):PLT、PDW、MPV和P-LCR、FIB在正常、DM、DPN人群間無差異,在DPN患者無過度表達(dá),不
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