野生革耳菌組成型漆酶的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大多數(shù)真菌漆酶的產(chǎn)生都需要芳香類小分子化合物的誘導(dǎo),該文首次報(bào)導(dǎo)野生革耳菌(Panus,rudis)在39℃液體振蕩培養(yǎng)條件下,不需誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo),能持續(xù)產(chǎn)生漆酶.優(yōu)化后培養(yǎng)基的碳氮源分別為2﹪(w/v)蔗糖和26mM酵母抽提物,最高酶活達(dá)1.6×10<'4>U/L (ABTS法),屬于目前已知的組成型漆酶高產(chǎn)菌株.發(fā)酵培養(yǎng)液經(jīng)硫酸銨沉淀,DEAE-Sepharose,Sephacry1 S-200,Mono Q 柱層析分離純化后,可得電

2、泳純漆酶蛋自,每升培養(yǎng)液可得到純化的漆酶約3mg.SDS-聚丙烯酚胺凝膠電泳檢測其分子量為58kDa,用HiPrep Sephacry1 S-200分子篩柱層析測定約為60kDa,表明該酶為單體蛋白.野生革耳菌漆酶的含糖量約為10﹪,等電點(diǎn)為pH3.5,紫外光譜掃描表明該酶具有Ⅰ型銅離子在610nm處的特征吸收峰及Ⅲ型銅離子在340nm的光吸收.以愈創(chuàng)木酚為底物,該酶的最適作用pH為4.5,最適反應(yīng)溫度為50℃,Km值為0.21mM,7

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