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1、尼羅羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus)為廣鹽性魚(yú)類,經(jīng)馴化后可以在一定范圍的鹽堿水中生存生長(zhǎng),是開(kāi)展耐鹽堿性能選育的重要候選種類。本論文以尼羅羅非魚(yú)耐鹽堿選育一代為材料,評(píng)估了幼苗急性鹽堿耐受性能,慢性鹽堿耐受性能及鹽堿水中生長(zhǎng)性能;利用 PCR擴(kuò)增技術(shù)獲得了尼羅羅非魚(yú)Na+/HCO3-共轉(zhuǎn)運(yùn)子(NBCe1)基因cDNA部分序列,比較了單鹽(10、15)、單堿(1.5、3g/L NaHCO3)、鹽堿混合(鹽度10,堿度
2、1.5g/L;鹽度15,堿度3g/L)脅迫后不同時(shí)間(0、6、12、24、48、72、96h)血清滲透壓、離子濃度(Na+、K+、Cl-、Ca2+)以及鰓碳酸酐酶(CA)活性、CA與NBCe1 mRNA表達(dá)變化,主要結(jié)果如下:
(1)以上海、河北、山東品系尼羅羅非魚(yú)基礎(chǔ)群體(F0代)和經(jīng)鹽堿馴化選育一代(F1代)幼魚(yú)為試驗(yàn)材料,比較它們?cè)诓煌}度組(10g/L、15g/L、20g/L、25g/L)中的半致死鹽度,碳酸氫鈉(Na
3、HCO3)堿度組(2g/L、4g/L、6g/L、8g/L、10g/L、12g/L)中的半致死堿度,以及鹽堿混合組(鹽度10g/L、15g/L、20g/L,堿度2g/L、4 g/L、6g/L)中的半致死鹽堿度。試驗(yàn)結(jié)果表明,尼羅羅非魚(yú)F1代幼魚(yú)96h的半致死鹽度為21.625-21.820,半致死堿度為7.903-8.407,半致死鹽堿度:10g/L鹽度下,堿度為5.577-6.096;15g/L鹽度下,堿度為3.940-4.794,F(xiàn)1
4、代幼魚(yú)96h半致死鹽堿度均顯著高于F0代幼魚(yú)(P<0.05)。選育一代中,河北品系幼魚(yú)鹽堿耐受能力顯著大于上海和山東品系(P<0.05)。研究結(jié)果為尼羅羅非魚(yú)鹽堿馴化選育研究提供了基礎(chǔ)資料。
(2)以尼羅羅非魚(yú)耐鹽堿選育一代為材料,開(kāi)展了幼魚(yú)慢性致死實(shí)驗(yàn)和魚(yú)種不同鹽堿環(huán)境(S0A0、S10A0、S10A2、S10A4、S10A6)中生長(zhǎng)試驗(yàn),評(píng)估選育一代的鹽、堿耐受性能和生長(zhǎng)性能。慢性致死實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,選育一代山東、上海、河北
5、品系的半致死鹽度分別為3.95±1.29、53.36±1.53、56.25±2.12g/L,半致死堿度分別為19.18±1.24、8.73±1.20、20.05±1.37g/L。生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)表明,隨著鹽堿濃度的增加,選育一代的日增重率表現(xiàn)為下降趨勢(shì)。S0A0組顯著大于其他各組(P<0.05),S10A0、S10A2組間無(wú)顯著差異(P>0.05),但顯著大于10A4、S10A6組(P<0.05);除S10A6組中山東品系日增重率大于上海、河北
6、品系(P<0.05)外,各鹽堿組中三個(gè)品系間無(wú)顯著差異。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為尼羅羅非魚(yú)耐鹽堿選育工作積累了基礎(chǔ)資料。
?。?)為了理解鹽堿條件下魚(yú)類滲透調(diào)節(jié)機(jī)制,以尼羅羅非魚(yú)為實(shí)驗(yàn)材料,PCR擴(kuò)增得到了Na+/HCO3-共轉(zhuǎn)運(yùn)子(NBCe1)基因cDNA部分序列,比較了單鹽(10、15)、單堿(1.5、3g/L NaHCO3)、鹽堿混合(鹽度10,堿度1.5g/L、鹽度15,堿度3g/L)脅迫后不同時(shí)間(0、6、12、24、48、72、
7、96h)血清滲透壓、離子濃度(Na+、K+、Cl-、Ca2+)以及鰓碳酸酐酶(CA)活性、CA與NBCe1基因mRNA表達(dá)變化。結(jié)果顯示,血清滲透壓、離子濃度、鰓組織CA酶活、CA與NBCe1基因mRNA表達(dá)變化均與脅迫強(qiáng)度呈正相關(guān)。隨時(shí)間推移,血清滲透壓、離子濃度呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢(shì),單鹽、鹽堿混合組血清滲透壓較單堿組高。單堿組和鹽堿混合組中鰓CA活性較單鹽組高,低鹽堿脅迫(鹽度10,堿度1.5g/L)下CA活性較晚達(dá)最高。單鹽
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