水稻oryzasatival.碳酸酐酶基因5′端啟動子不同區(qū)域?qū)虮磉_(dá)影響的研究

1、東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文水稻（Oryza sativa L.）碳酸酐酶基因5′端啟動子不同區(qū)域?qū)虮磉_(dá)影響的研究姓名：闞彬彬申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：園林植物與觀賞園藝指導(dǎo)教師：柳蔘奎20050601東北林業(yè)人學(xué)碩I j 學(xué)位論文A b s t r a c tP r o m o t e ri s i m p o r t a n tt od e c i d eg e n ew h e n a n dw h e r e e x p r e

2、s s i o n ．I tp l a y st h em a i nr o l ef o l l o w i n g t h et r a n s g e n et e c h n i cw a s i n v e n t e d ．A tp r e s e n t ，t h ep r o m o t e r o f C a M V 3 5 S w a s u s e di n t r a n s g e n e ．H o w e v

3、 e r ，t h e n e g a t i v e i n f e c t i o n a p p e a r w i t h a b u n d a n c e e x p l i c i t g e n ee x p r e s s i n g ．S o t h ep r o m o t e rw a s e x p e c t e dt h a tc a n f u l f i l t h ed i f f e r e n t

4、r e q u i r e sw h i c hm a k e t h eg e n ee x e p r e s s i nc o r r e s p o n dt op e r s o nd e s i r e ，T h eb a s i cr e s e a r c h w a s n e c e s s a r y a b o u tp r o m o t e ri fw a n t t oa c h i e v et h i

5、sw i s h ．W ei n v e t e do n t h ec a r b o n i ca n h y d r a s ep r o m o t e ri n r i c e B a s eo nt h er e p o r t e d5 ’f l a n k i n gr e g u l a t m ’Yr e g i o n s o fc a r b o n i ca n h y r a s e ，w ed e s i

6、g n e df o u rp r i m e r s i nd i 髓r e n t p o s i t i o n so ft h eu p s t r e a m ．a(chǎn) n dd o n w n s t r e a mp r i m e rb e f o r et h et r a n s l a t i o ni n i t i a t i o nA T G c o d o n ．T h ef r a g m e n t so

7、f 一1 ，6 0 0b p ，一9 6 4b p ，一5 8 5b p a n d 一3 1 3b p w e r e a m p l i f i e db yu s i n gP C R ．a(chǎn) n d t h e y w e r ec l o n e d i n t o p B l 1 2 1 p l a s m i d b y f u s i n g w i t h t h er e p o r t e r g e n ee n

8、c o d i n g B —g l u c m ‘o n i d a s e f G U S ) I - h e t r a n s g e n c t i c t o b a c c o p l a n t s w e r e o b t a i n e d b yA g r o b a c t e r i u ml u m e f a c i e n s —m e d i a t e d t r a n s f o r m a t

9、 i o n ．T h e o b j e c t i v e g e n ew a sf o u n d i n t h et r a n s g e n e t i c t o b a c c o t h r o u g h S o u t h e r n d e t e c t i o n H i s t o c h e m i c a l a n a l y s i s i n d i c a t e d t h a t ——1

10、 ，6 0 0 b p ～Or e g i o n o ft h ep r o m o t e rd i r e c t G U S e x p r e s s i o n i n t h e l e a v e s a n ds t e m so ft h et r a n s g e n i c t o b a c c o p l a n t ．a(chǎn) n dt h e o t h e r r e g i o n s ( 一9 6 4b

11、 p ～0 ，·5 8 5 b p ～O ，一3 1 3 b p r ～0 ，r e s p e c t i v e l y ) d on o t d i i ’e c t G U S e x p r e s s i o n ．T h i s 1 ．e s u l t s i n d i c a t e dt h a t 一1 ．6 0 0 b p ～0r e g i o no f t 1 1 e p r o m o t e

12、rr e g u l a t eg e n es p e c i f i ce x p r e s s i o ni n l e a fa n ds t e mn o t i nr o o t ．T h eh i g hG Cr e g i o n w a s f o u n db e t w e e n 一4 0 4b pt o 一5 3 b p ，w h i c hw a s s i m i l a r l yt ot h ec a

13、 r b o n i ca n h y d r a s eI Ip r o m o t e ro f p e r s o n a n d r a tw i t hr i c hG C ．K e y w o r d s R i c ef O r y z as a t i _ l ，“L 1 ：C a r b o n i ca n h y r a s e ；P r o m o t e r ：’F r a n s g e n e t i ct