乙酸鈉通過(guò)刺激魚(yú)體攝食與胰島素分泌促進(jìn)宿主脂肪沉積.pdf

1、短鏈脂肪酸(short fatty acids，SCFAs)是腸道微生物菌群在體內(nèi)發(fā)酵不易消化的碳水化合物產(chǎn)生，含少于6個(gè)碳原子且溶于水的游離脂肪酸，主要包括乙酸、丙酸、丁酸等。隨著腸道微生物的研究深入，微生物代謝產(chǎn)物-短鏈脂肪酸也被報(bào)道出具有重要的生理功能。在哺乳動(dòng)物中，乙酸鹽已經(jīng)被報(bào)道可調(diào)控宿主體重，葡萄糖平衡和胰島素敏感性。然而在水產(chǎn)動(dòng)物中乙酸鹽相關(guān)作用機(jī)理研究較少。
　　本研究第一部分以斑馬魚(yú)作為研究對(duì)象，飼料中添加不同濃

2、度乙酸鈉(0.05％、0.1％、0.15％，0.2％)，以飽食投喂的方式飼喂斑馬魚(yú)兩周，結(jié)果表明0.15％乙酸鈉添加量能夠顯著增加斑馬魚(yú)增重率(P＜0.05)和日攝食率(P＜0.05)。檢測(cè)斑馬魚(yú)總代謝能(TS)、標(biāo)準(zhǔn)代謝能(RS)、活動(dòng)代謝能(Ra)發(fā)現(xiàn)0.15％處理組顯著降低(P＜0.05)，并伴隨著斑馬魚(yú)能量轉(zhuǎn)化效率的升高(P＜0.01)，表明乙酸鈉促進(jìn)斑馬魚(yú)能量蓄積。進(jìn)一步通過(guò)斑馬魚(yú)體成分分析、肝臟甘油三酯含量(TG)測(cè)定、肝臟

3、油紅染色、肝臟以及肌肉HE切片分析，表明乙酸鈉添加促進(jìn)斑馬魚(yú)肝臟脂肪沉積。檢測(cè)斑馬魚(yú)腸道、肝臟及肌肉糖代謝、脂代謝、蛋白質(zhì)代謝基因表達(dá)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸鈉添加組斑馬魚(yú)腸道糖酵解基因表達(dá)水平顯著性降低(P＜0.05)，腸道蛋白合成基因顯著性升高(P＜0.05)、蛋白降解基因顯著性降低(P＜0.05)。肝臟脂合成基因表達(dá)水平、蛋白合成及降解基因表達(dá)水平顯著升高(P＜0.05)，表明乙酸鈉促進(jìn)斑馬魚(yú)脂肪和蛋白合成，抑制斑馬魚(yú)糖酵解和蛋白降解。同

4、時(shí)也檢測(cè)了斑馬魚(yú)餐后4h-6h血漿血糖水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸鈉添加組血糖顯著降低(P＜0.05)，檢測(cè)斑馬魚(yú)肝、腦、腸胰島素分泌基因表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)乙酸鈉添加能夠顯著提高胰島素分泌基因表達(dá)水平，說(shuō)明乙酸鈉添加促進(jìn)胰島素的分泌。另一方面，測(cè)定斑馬魚(yú)腦部促進(jìn)攝食基因及抑制攝食基因表達(dá)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)0.15％處理組顯著提高斑馬魚(yú)促進(jìn)攝食基因表達(dá)量(P＜0.05)。
　　本實(shí)驗(yàn)第二部分為盡量排除乙酸鈉實(shí)驗(yàn)斑馬魚(yú)攝食過(guò)多對(duì)斑馬魚(yú)生長(zhǎng)表現(xiàn)的影響，用0

5、.15％乙酸鈉限飼投喂斑馬魚(yú)，發(fā)現(xiàn)限飼投喂0.15％乙酸鈉顯著性提高斑馬魚(yú)增重率(P＜0.05)和飼料轉(zhuǎn)化效率(P＜0.05)，并促進(jìn)斑馬魚(yú)肝臟脂肪蓄積。
　　本研究第三部分建立斑馬魚(yú)腦室注射模型，進(jìn)一步探討乙酸鈉發(fā)揮作用機(jī)制。利用成年斑馬魚(yú)進(jìn)行腦室注射乙酸鈉實(shí)驗(yàn)，并統(tǒng)計(jì)斑馬魚(yú)2h、4h、6h、8h、24h、48h累計(jì)攝食率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腦室注射乙酸鈉(1.2μmol/g body weight，BW)增加斑馬魚(yú)48h累計(jì)攝食率

6、(P=0.11)。檢測(cè)腦室注射后不同時(shí)間點(diǎn)攝食基因表達(dá)量發(fā)現(xiàn)乙酸鈉能夠提高促進(jìn)攝食基因表達(dá)水平。同樣地，測(cè)定斑馬魚(yú)腦室注射2h、4h、6h后血糖、胰島素含量變化和檢測(cè)斑馬魚(yú)不同時(shí)間點(diǎn)腦肝腸胰島素分泌相關(guān)基因表達(dá)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸鈉注射顯著性提高斑馬魚(yú)胰島素分泌基因表達(dá)量和血漿胰島素水平(P＜0.05)。
　　本研究第四部分通過(guò)建立斑馬魚(yú)乙酸鈉阿托品腦室共注射模型，進(jìn)一步探討乙酸鈉參與腦循環(huán)途徑。斑馬魚(yú)腦室共注射(1)生理鹽水;(2)

7、阿托品+生理鹽水;(3)阿托品+乙酸鈉1.2μmol/gBW;4)生理鹽水+乙酸鈉1.2μmol/gBW。一方面，測(cè)定斑馬魚(yú)腦室注射2h、4h、6h后血糖、胰島素含量變化情況，另一方面，檢測(cè)斑馬魚(yú)不同時(shí)間點(diǎn)腦肝腸胰島素分泌相關(guān)基因及攝食相關(guān)基因表達(dá)量，研究結(jié)果表明腦室共注射阿托品能夠阻止乙酸鈉產(chǎn)生的作用。阿托品作為副交感神經(jīng)抑制劑，說(shuō)明乙酸鈉通過(guò)副交感神經(jīng)發(fā)揮作用。
　　通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)乙酸鈉促進(jìn)斑馬魚(yú)體重增加主要是由于乙酸鈉通過(guò)副交