人參中與miRNA調(diào)控相關(guān)的蛋白AGO1基因克隆與序列分析.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本文采用RACE(rapid-amplificationofcDNAends)cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)對(duì)藥用植物人參中與miRNA調(diào)控相關(guān)重要蛋白Argonaute1(PgAGO1)的基因進(jìn)行了克隆。從人參葉片中克隆PgAGO1的全長(zhǎng)基因，并利用生物信息學(xué)方法進(jìn)行分析。根據(jù)人參EST序列設(shè)計(jì)基因特異性引物，采用RACE方法對(duì)PgAGO1的cDNA全長(zhǎng)進(jìn)行克隆，并對(duì)PgAGO1蛋白的結(jié)構(gòu)、功能等進(jìn)行初步分析;同時(shí)采用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)Pg

2、AGO1基因在人參不同組織根、莖、葉、花和愈傷中表達(dá)水平?？寺〉腜gAGO1全長(zhǎng)cDNA為3776bp，其中包括5'UTR204bp、3'UTR254bp，基因內(nèi)部包含完整的開(kāi)放閱讀框，可編碼1103個(gè)氨基酸，預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)分子量為122.22KDa，理論等電點(diǎn)pI9.71;系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)顯示:AGO蛋白產(chǎn)生于單子葉和雙子葉植物分化之前，PgAGO1與AtAGO1、AtAGO10,OsAGO1d、OsAGO1c、OsAGO1b、OsAGO1a、

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