經(jīng)血來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MenSCs)在急性肺損傷(ALI)治療中作用的研究.pdf

1、間充質(zhì)干細(xì)胞是一種來(lái)源于中胚層的成體干細(xì)胞，具有自我更新和多向分化潛能等特點(diǎn)，可以在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮重要的作用。經(jīng)血來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MenSCs)是間充質(zhì)干細(xì)胞中的一員，主要從女性月經(jīng)血中提取，具有獲取方便，安全無(wú)毒副作用等優(yōu)點(diǎn)。相較于其他來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞，MenSCs沒有倫理及創(chuàng)傷方面的困擾，且能不斷從同一志愿者獲得大量相同遺傳背景的細(xì)胞。目前，MenSCs已經(jīng)被用于心肌梗死、Ⅰ型糖尿病等多種疾病的治療研究。許多感染性疾病如H7

2、N9，敗血癥及一些細(xì)菌尤其是Gram-的感染均可以引起急性肺損傷，然而，目前尚未發(fā)現(xiàn)MenSCs在急性肺損傷(ALI)方面的應(yīng)用。本課題主要研究MenSCs在ALI的生物治療中的作用。
　　在本研究中，我們首先對(duì)MenSCs的進(jìn)行了驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)分離的細(xì)胞呈梭狀，表達(dá)CD29，CD44，CD73，CD90，CD105，不表達(dá)CD34，CD45以及CD11b，CD14，CD19，CD79a，CD117和HLA-DR分子，符合國(guó)際細(xì)胞治療

3、學(xué)會(huì)制定的MSCs標(biāo)準(zhǔn)，為MSCs中的一員。同時(shí)我們證實(shí)了MenSCs具有良好的體外增殖能力，可以進(jìn)行成骨成脂分化，具有多向分化能力。此外，我們還發(fā)現(xiàn)MenSCs可以表達(dá)CD140b，CD194，CD221，及CD184等趨化因子或者具有趨化能力的相關(guān)因子的受體，可以在多種細(xì)胞因子的刺激下進(jìn)行遷移，發(fā)揮靶向治療的作用。
　　接著，我們探討了MenSCs在治療ALI中的作用。在體外實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MenSCs可以向暴露于LPS的肺支

4、氣管上皮細(xì)胞BEAS-2B遷移，并保護(hù)其活性，減少細(xì)胞凋亡。同時(shí)，我們?cè)隗w外對(duì)MenSCs進(jìn)行了誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)后的細(xì)胞成扁平的上皮樣形狀，并表達(dá)SPB，SPC和SPD等肺表面活性蛋白。在LPS誘導(dǎo)的ALI模型小鼠體內(nèi)，我們用X線和病理組織切片證實(shí)MenSCs可以緩解小鼠肺部炎癥癥狀，減少損傷。而肺干/濕比和β-catenin蛋白表達(dá)的升高及支氣管肺泡灌洗液(BALF)總蛋白的下降則提示著MenSCs移植后小鼠肺通透性的改善。我們對(duì)BAL

5、F中炎性細(xì)胞，MPO檢測(cè)進(jìn)一步驗(yàn)證了MenSCs抑制肺部炎癥的作用。同時(shí)，我們還發(fā)現(xiàn)MenSCs可以提高PCNA的表達(dá)量，減少Caspase-3的表達(dá)量，促進(jìn)損傷肺的修復(fù)。
　　最后，我們探討了MenSCs治療急性肺損傷的可能機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)，在MenSCs移植后，小鼠BALF，血清及肺實(shí)質(zhì)中抑炎癥因子IL-10，TGF-β表達(dá)升高，促炎癥因子IL-1β和IL-6表達(dá)降低，表明MenSCs可能是通過(guò)免疫調(diào)節(jié)的作用來(lái)抑制炎癥。同時(shí)，我