生酮飲食對(duì)嬰兒痙攣癥患兒mTOR信號(hào)通路及免疫功能的影響.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)嬰兒痙攣癥（Infantile spasms, IS）患兒在生酮飲食（Ketogenic diet, KD）治療前后外周血CD4+T細(xì)胞哺乳動(dòng)物類雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin, mTOR）通路及其上下游活性因子的改變，以及CD4＋I(xiàn)NF-γ＋(Helper T cell1, Th1)細(xì)胞、CD4＋I(xiàn)L17A＋(Helper T cell17, Th17)細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T（Regu

2、latory cells,Treg）細(xì)胞的改變，探討KD是否可以通過(guò)抑制mTOR信號(hào)通路，減輕IS病人的免疫功能紊亂及免疫損傷，最終減輕癲癇發(fā)作。
　　方法：研究對(duì)象選自2015年3月至2016年3月期間在深圳市兒童醫(yī)院確診的IS患兒68例，根據(jù)治療方案不同分為觀察組和對(duì)照組，入組后分別進(jìn)行KD和促腎上腺皮質(zhì)激素（Adrenocorticotropic hormone,ACTH）治療。其中KD組（觀察組）42例， ACTH組（對(duì)照

3、組）為同期在該院確診的IS患兒26例。兩組對(duì)象分別于治療前1周內(nèi)、治療后1周時(shí)取血備檢，在上述時(shí)間窗檢測(cè)外周血CD4+T細(xì)胞的mTOR信號(hào)通路以及Th1、Th17、Treg細(xì)胞變化。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血Th1、Th17、Treg的比例，實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Real time polymerase chain reaction, RT-PCR）檢測(cè)外周血CD4+T細(xì)胞 mTOR、腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated pro

4、tein kinase, AMPK）和 S6K激酶（S6 kinases,S6K）的mRNA表達(dá)水平，酶聯(lián)免疫吸附試（Enzyme-linked immunosorbent Assay, ELISA）測(cè)定血漿可溶性γ干擾素（Interferon gamma,IFN-γ）、白細(xì)胞介素4(Interleukin4,IL-4)、白細(xì)胞介素17A(Interleukin17,IL-17A)蛋白含量。
　　結(jié)果：1.治療前KD組和ACTH組

5、的Treg細(xì)胞占全血CD4＋細(xì)胞比例[(2.15±0.68)％vs(2.30±0.73)%,P>0.05]，無(wú)顯著差異；治療1周后KD組Treg細(xì)胞比例高于ACTH組[(3.81±0.69)%vs(3.04±0.82)%,P<0.01]；KD治療后Treg細(xì)胞比例明顯升高(P<0.01)， ACTH治療后Treg細(xì)胞比例有升高趨勢(shì)，但無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　2.治療前KD組和ACTH組的IS患兒體內(nèi)Th1、Th17

6、效應(yīng)T細(xì)胞表達(dá)的比例均未見(jiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，[(10.03±2.30)%vs(9.49±2.24)%， P>0.05]、[(1.96±0.48)%vs(1.76±0.27)%，P>0.05]；KD治療后患兒Th1、Th17細(xì)胞比例較治療前明顯降低，[(10.03±2.30)%vs(7.63±2.42)%，P<0.05]、[(1.96±0.48)%vs(1.50±0.47)%，P<0.05]；治療后ACTH組Th1、Th17細(xì)胞比例低于KD

7、組[(9.49±2.24)%vs(6.21±1.90)%，P<0.05]、[(1.76±0.27)%vs(0.78±0.25)%，P<0.05]。
　　3.兩組患兒治療前CD4＋T淋巴細(xì)胞S6 K的mRNA表達(dá)比較無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異[(0.177±0.037) vs(0.160±0.021)，P>0.05]，KD治療后CD4＋T淋巴細(xì)胞S6K的mRNA表達(dá)較治療前明顯下降[(0.177±0.037)vs(0.121±0.036)

8、，P<0.05]，ACTH治療后對(duì) S6K mRNA表達(dá)有下降趨勢(shì)，但統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)明顯差異[(0.160±0.021) vs(0.144±0.036)，P>0.05]。
　　4.在治療前， KD組和 ACTH組 mTOR的mRNA表達(dá)量未見(jiàn)明顯差異[(5.51±1.27)×10-2 vs(5.25±1.01)×10-2,P>0.05];KD治療1周后mTOR的mRNA表達(dá)量有明顯的下降趨勢(shì)[(5.51±.1.27)×10-2 vs(4

9、.22±0.97)×10-2,P<0.05]，ACTH組在治療后mTOR的mRNA表達(dá)量與治療前相比較未見(jiàn)明顯差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：1.KD可提高IS（West綜合征）患兒外周血中CD4＋CD25＋Foxp3(Treg)細(xì)胞的表達(dá)水平，同時(shí)下調(diào)Th細(xì)胞亞群的比例，抑制相關(guān)炎性因子的產(chǎn)生，減輕免疫功能紊亂。
　　2.CD4＋細(xì)胞中mTOR、S6K的mRNA表達(dá)與Treg細(xì)胞比例呈明顯負(fù)相關(guān)，與Th1、Th17細(xì)胞比