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文檔簡介
1、目的:
通過本實驗,觀察電針和艾灸聯(lián)合運用對阿爾茨海默病模型大鼠行為學以及海馬CA1區(qū)細胞周期調(diào)節(jié)因子cyclinE、p21/cip的影響,探討電針加艾灸改善AD模型大鼠的學習記憶能力和影響神經(jīng)細胞凋亡的機制。以期進一步揭示中醫(yī)針灸治療AD的作用機理,并為針灸在臨床上更好地防治AD提供實驗依據(jù)。
方法:
將雄性wistar大鼠90只進行Y型水迷宮測試(即將反應過于靈敏和過于遲鈍的大鼠剔除),經(jīng)篩
2、選出的標準大鼠再隨機分成4個組:正常組、假手術組、模型組、電針加艾灸組(以下簡稱治療組),每組20只。用微量注射器從雙側(cè)海馬CA1區(qū)注入Aβ1-42寡聚體制作AD大鼠模型。
造模成功后,治療組先用電針刺激再用艾條溫和灸大鼠的“百會”、“腎俞”穴,治療完成后的第二天即開始進行Morris水迷宮(Morris watermaze,MWM)定位航行實驗和空間探索實驗,實驗共歷時5天,實驗結(jié)束當天即取材,采用免疫組織化學法和免疫印
3、跡法檢測大鼠海馬區(qū)cycl inE、p21/cip含量的變化。用SPSS Statistics17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。
結(jié)果:
1.行為學檢測結(jié)果:經(jīng)過定位航行實驗和空間探索實驗的測試,正常組與假手術組相比,大鼠的逃避潛伏期、跨越原平臺的次數(shù)和在原平臺停留的時間均無明顯差異(P>0.05);與模型組比較,正常組、假手術組和治療組都存在顯著性差異(P<0.05),治療組的行為學檢測明顯優(yōu)于模型組(P<
4、0.05);與治療組比較,正常組和假手術組有顯著差異性(P<0.05)。
2.免疫組化結(jié)果表明:正常組與假手術組相比,cyclinE和p21/cip的表達均不存在顯著差異性(P>0.05);與模型組比較,正常組、假手術組和治療組大鼠海馬區(qū)的cyclinE和p21/cip表達量均存在顯著性差異(P<0.05),其中,模型組大鼠cyclinE的陽性細胞個數(shù)明顯多于其他三組。而p21/cip的陽性細胞個數(shù)明顯少于其他三組(P<0
5、.05);與治療組比較,正常組和假手術組p21/cip的陽性細胞數(shù)有顯著差異性(P<0.05)。
3.免疫印跡結(jié)果表明:治療組大鼠海馬CA1區(qū)cyclinE表達量高于正常組和假手術組(P<0.05),且治療組明顯低于模型組(P<0.05);p21/cip在模型組的表達明顯少于正常組和假手術組(P<0.05),而治療組明顯多于模型組(P<0.05)。
結(jié)論:
1.因為AD的根本病機是腎虛髓空、神機
6、失用,故本研究選用百會和腎俞穴進行艾灸和電針刺激,可以達到益腎填髓、聰腦益智的治療目的。
2.通過電針和艾灸的聯(lián)合治療能有效提高AD模型大鼠的學習和記憶功能,減輕其不斷退化的記憶和認知功能所造成的癥狀,從而延緩衰老的進程。
3.電針加艾灸能明顯降低AD模型大鼠海馬CA1區(qū)cyclinE的過度表達,增加p21/cip的表達量,從而調(diào)控細胞的分裂周期,減少神經(jīng)元的凋亡。
4.針灸治療阿爾茨海默病的作
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