胞質(zhì)雄性不育新基因T1243在大白菜中的遺傳轉化.pdf

1、目前在大白菜雜交育種實踐中，雄性不育材料非常少，本研究旨在將從莖瘤芥(B.juncea var.tumida Tsen et Lee)胞質(zhì)雄性不育系中克隆獲得的T1243基因整合到大白菜基因組中。首先構建含有莖瘤芥的細胞質(zhì)雄性不育新基因T1243的植物表達載體XF003-T1243;建立大白菜的離體再生體系;并對大白菜的遺傳轉化體系進行優(yōu)化，成功獲得轉基因植株。豐富大白菜不育系的育種材料，為細胞質(zhì)雄性不育機理研究奠定了基礎。
　　

2、 本試驗的主要研究結果如下:
　　 1、大白菜再生體系的建立:以山西地區(qū)廣泛栽培的5個大白菜品種為材料，帶柄子葉為外植體，通過正交設計試驗研究了品種、NAA、6-BA、AgNO3等因素對大白菜離體再生的影響。結果顯示:品種津育75在培養(yǎng)基MS+2mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+7mg/LAgNO3的條件下再生率最高，達76.92％。
　　 2、植物表達載體XF003-T1243的構建:分別酶切從莖瘤芥中擴增獲得

3、的T1243和表達載體XF003，然后進行連接，構建了細胞質(zhì)雄性不育線粒體基因T1243的植物表達載體XF003-T1243，通過PCR和酶切鑒定XF003-T1243載體構建正確，并導入農(nóng)桿菌LBA4404。
　　 3、大白菜的遺傳轉化體系的優(yōu)化:以大白菜帶柄子葉為外植體，通過農(nóng)桿菌介導法，優(yōu)化大白菜的遺傳轉化體系，得出結論:津育75的最佳篩選培養(yǎng)基為MS+2.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+7.0mg/LAgNO3