負(fù)壓吸引法在靜脈淤血皮瓣動物模型中的實驗研究.pdf

1、目的:(1)在靜脈淤血皮瓣不同位置放置負(fù)壓引流管后皮瓣形態(tài)學(xué)變化及差異。(2)不同位置放置負(fù)壓引流管對于靜脈淤血皮瓣微循環(huán)及皮瓣氧代謝的影響。(3)負(fù)壓吸引與淤血靜脈再通對于靜脈淤血皮瓣微循環(huán)及氧代謝影響的比較。通過觀察研究負(fù)壓吸引法對靜脈淤血皮瓣治療后微循環(huán)的變化,探索簡便有效救治靜脈淤血皮瓣的方法,為進(jìn)一步指導(dǎo)臨床工作提供新的思路和理論基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1.實驗動物:新西蘭長耳白兔健康清潔級40只,雌雄各半

2、,體重質(zhì)量2.5～3kg。
　　 2.動物模型建立:于皮瓣模型制作前三天,各組白兔行5％硫化鈉腹部脫毛,脫毛面積從兩側(cè)腹股溝向上至劍突水平,兩側(cè)脫毛至腋中線范圍內(nèi),溫水沖洗自然晾干后用紗布墊及彈力網(wǎng)套包扎好,以保溫并防止腹部皮膚與籠網(wǎng)挫傷。鹽酸塞拉嗪(速眠新)和氯胺酮1:1等比例配好,按照0.2ml/kg體重肌肉內(nèi)注射進(jìn)行麻醉,根據(jù)麻醉情況可于1小時后再次追加0.1ml/kg劑量藥液維持麻醉。麻醉成功后,取仰臥位,將其四肢捆綁于

3、兔臺上,捆綁牙線防止咬傷。0.5%碘伏消毒術(shù)區(qū),于兔下腹部以腹壁下淺靜脈為軸心設(shè)計軸行皮瓣,面積約12×4cm,并依據(jù)分組對相應(yīng)血管進(jìn)行處理。
　　 3.實驗動物分組:每只新西蘭長耳白兔做兩個下腹部皮瓣,采用隨機(jī)數(shù)字分配法,將80個皮瓣分為4組,即對照組,近端引流組,遠(yuǎn)端引流組和靜脈再通組。每組共20個皮瓣,每組內(nèi)再采用隨機(jī)數(shù)字分配法將每組20個皮瓣分為掃描皮瓣12個,取材皮瓣8個。
　　 4.激光多普勒掃描:采用丹麥產(chǎn)

4、lasa激光多普勒微循環(huán)圖像儀進(jìn)行兔腹部皮瓣的掃描。分別掃描手術(shù)后2h、4h、8h、24h、3d和7d的結(jié)果。
　　 5.取材:4個組共計取材皮瓣32個,取材選擇于術(shù)后即刻、4h、8h、24h、3d、7d六個時間點(diǎn),將皮瓣分成上、中、下三個區(qū)域,于各個區(qū)域同一時間點(diǎn)分別切取0.5×0.5cm皮膚。
　　 6.檢測方法及觀測指標(biāo):
　　 6.1激光多普勒掃描成像儀掃描皮瓣特定區(qū)域,記錄皮瓣微循環(huán)血流量數(shù)據(jù)結(jié)果。

5、r>　　 6.2皮瓣組織丙二醛(Maleic Dialdehyde MDA)分光光度法監(jiān)測:對取樣組織首先進(jìn)行勻漿處理,將勻漿組織進(jìn)行水浴離心后,取上清液,依照南京建成MDA.試劑盒要求,進(jìn)行分光光度計比色,測算MDA含量。
　　 7.統(tǒng)計學(xué)處理:所有實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,采用spss13.0進(jìn)行檢驗,顯著性分析以p＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.大體觀察結(jié)果:皮瓣制

6、備后4小時,各組皮瓣均出現(xiàn)腫脹,皮瓣遠(yuǎn)端呈現(xiàn)暗紫色,對照組腫脹最為明顯,腫脹面積最大;24小時后各組皮瓣腫脹進(jìn)一步加重,對照組腫脹進(jìn)一步加重,同時皮瓣遠(yuǎn)端大約1/3面積顏色呈暗紫色,斑片狀黑褐色痂皮形成。
　　 近端引流組和遠(yuǎn)端引流組及靜脈再通組皮瓣腫脹較對照組輕微,暗紫色面積小。遠(yuǎn)端引流組引流液約為2ml,明顯多于較近端引流組。
　　 3天后各組皮瓣暗紫區(qū)域與正常區(qū)域界限逐漸明顯,近端引流組和遠(yuǎn)端引流組及靜脈再通組皮瓣

7、暗紫區(qū)域明顯小于對照組皮瓣。7天后皮瓣遠(yuǎn)端部分壞死區(qū)域黑色痂皮形成,界限清楚。
　　 2.激光多普勒成像儀結(jié)果:
　　 2.1皮瓣遠(yuǎn)段1/3區(qū)域手術(shù)后4h、8h、24h、3d及7d,近端引流組、遠(yuǎn)端引流組、再通組均與對照組間皮瓣微循環(huán)血流量數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。手術(shù)后24小時,遠(yuǎn)端引流組、再通組分別與近端引流組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.2皮瓣中1/3區(qū)域手術(shù)后4h、8

8、h、24h、3d及7d,近端引流組、遠(yuǎn)端引流組、再通組均與對照組間皮瓣微循環(huán)血流量數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。手術(shù)后3天,遠(yuǎn)端引流組、再通組分別與近端引流組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.3皮瓣近段1/3區(qū)域手術(shù)后4h、8h、24h、3d及7d,近端引流組、遠(yuǎn)端引流組、再通組均與對照組間皮瓣微循環(huán)血流量數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。手術(shù)后3d及手術(shù)后7d,近端引流組、再通組與遠(yuǎn)端

9、引流組間有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3丙二醛結(jié)果:經(jīng)測定皮瓣遠(yuǎn)、中、近3個區(qū)域內(nèi)丙二醛的含量,進(jìn)行比較由遠(yuǎn)段到近段丙二醛含量逐漸降低,術(shù)后4h、8h、24h各組皮瓣遠(yuǎn)、中、近段間丙二醛含量間有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);術(shù)后3d各組皮瓣內(nèi)丙二醛含量達(dá)到峰值,皮瓣遠(yuǎn)端區(qū)域再通組與近端引流組及遠(yuǎn)端引流組間有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。3d之后各組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.負(fù)壓

10、吸引法可以有效減輕靜脈淤血皮瓣的腫脹和淤血范圍。
　　 2.靜脈淤血皮瓣早期(術(shù)后3天)可出現(xiàn)皮瓣缺氧而引起氧代謝障礙,皮瓣遠(yuǎn)端區(qū)域缺氧損傷更加明顯,再通淤血靜脈后皮瓣遠(yuǎn)端出現(xiàn)缺氧加重情況,可能為缺血再灌注對皮瓣造成的二次缺血所導(dǎo)致。
　　 3.早期在皮瓣遠(yuǎn)端放置負(fù)壓引流可有效改善皮瓣遠(yuǎn)端的血液循環(huán);于皮瓣蒂部放置負(fù)壓引流可有效促進(jìn)皮瓣近端的血液循環(huán),有利于皮瓣近段的后期愈合。在皮瓣遠(yuǎn)端區(qū)域,負(fù)壓吸引與再通淤血靜脈后治療