細(xì)胞培養(yǎng)密度對(duì)乳腺癌4T1細(xì)胞轉(zhuǎn)移及增殖能力影響的初探.pdf

1、目的：探討細(xì)胞培養(yǎng)密度對(duì)乳腺癌4T1細(xì)胞黏附、浸潤(rùn)、遷移和克隆形成能力，以及其對(duì)4T1細(xì)胞在小鼠體內(nèi)成瘤和轉(zhuǎn)移的影響。
　　方法：利用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，將小鼠乳腺癌4T1細(xì)胞培養(yǎng)至匯合度為60％（低密度培養(yǎng)細(xì)胞模型）和90%（高密度培養(yǎng)細(xì)胞模型）；利用黏附實(shí)驗(yàn)考察低密度和高密度培養(yǎng)來源的4T1細(xì)胞的基質(zhì)黏附能力；利用Matrigel基質(zhì)膠包被的Transwell小室浸潤(rùn)實(shí)驗(yàn)考察低密度和高密度培養(yǎng)來源的4T1細(xì)胞浸潤(rùn)能力；利用劃痕修

2、復(fù)實(shí)驗(yàn)和Transwell小室跨膜遷移實(shí)驗(yàn)考察低密度和高密度培養(yǎng)來源4T1細(xì)胞的遷移能力；利用克隆實(shí)驗(yàn)考察低密度和高密度培養(yǎng)來源的4T1細(xì)胞的增殖能力；將相同數(shù)量的低密度和高密度培養(yǎng)來源的4T1細(xì)胞經(jīng)皮下注射到小鼠右側(cè)腋窩下方，復(fù)制BALB/c小鼠的4T1細(xì)胞移植乳腺癌模型，考察低密度和高密度培養(yǎng)來源的4T1細(xì)胞在體增殖及轉(zhuǎn)移能力，檢測(cè)移植瘤體積、肺轉(zhuǎn)移病灶數(shù)，采用HE染色確定腫瘤，肺臟連續(xù)切片檢測(cè)轉(zhuǎn)移灶數(shù)目。
　　結(jié)果：

3、　?。?）相對(duì)于低密度培養(yǎng)，高密度培養(yǎng)來源的乳腺癌4T1細(xì)胞的黏附能力增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　（2）相對(duì)于低密度培養(yǎng)，高密度培養(yǎng)來源的乳腺癌4T1細(xì)胞穿過Matrigell基質(zhì)膠和Transwell小室碳酸脂膜的細(xì)胞數(shù)目明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　?。?）相對(duì)于低密度培養(yǎng)，高密度培養(yǎng)來源乳腺癌4T1細(xì)胞的劃痕修復(fù)能力增強(qiáng)，且穿過Transwell小室碳酸脂膜的細(xì)胞數(shù)目明顯增加，差異有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　?。?）相對(duì)于低密度培養(yǎng)，高密度培養(yǎng)來源的乳腺癌4T1細(xì)胞形成克隆的數(shù)目明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　(5)相對(duì)于低密度培養(yǎng)，高密度培養(yǎng)來源的乳腺癌4T1細(xì)胞在BALB/c小鼠中移植位點(diǎn)形成腫瘤結(jié)節(jié)的體積顯著增大，肺臟轉(zhuǎn)移灶數(shù)目明顯增加，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　?。?）高密度培養(yǎng)能夠增強(qiáng)乳腺癌4T1細(xì)胞的黏附、浸潤(rùn)、遷移和克隆增殖能