黑素細(xì)胞胞吐方式的直觀證據(jù)研究.pdf

1、背景：
　　燒傷創(chuàng)面恢復(fù)后往往伴有色素過(guò)度或色素缺失，影響美觀或抗紫外線能力。眾所周知，黑素小體由黑素細(xì)胞合成并轉(zhuǎn)移至角質(zhì)形成細(xì)胞，在KC中重新分布，呈現(xiàn)皮膚顏色。黑素小體在皮膚色素性疾病中有著舉足輕重的生物學(xué)意義。
　　在人體皮膚組織中，MC可以分泌黑素小體，目前黑素細(xì)胞分泌黑素小體的方式及機(jī)制尚不清楚，但可以肯定的是黑素小體的分泌必定會(huì)引起黑素細(xì)胞表面形態(tài)的變化，因而我們通過(guò)對(duì)細(xì)胞表面的形態(tài)進(jìn)行觀察研究，采用對(duì)形態(tài)觀察效

2、果較好的原子力顯微鏡（AFM）及掃面電鏡（SEM）進(jìn)行觀察拍攝，試圖運(yùn)用直觀方法驗(yàn)證MC中黑素小體的傳遞過(guò)程。
　　目的：
　　黑素小體的傳遞過(guò)程總會(huì)引起細(xì)胞表面形態(tài)的變化，原子力顯微鏡（AFM）及環(huán)境掃描電鏡(ESEM)可以觀察到納米水平的物質(zhì)表面形態(tài)，為了探究色素沉著機(jī)制。因此，我們通過(guò)AFM及ESEM對(duì)分泌黑素小體前后表面變化情況進(jìn)行觀察，采集黑素細(xì)胞分泌黑素小體后形態(tài)變化的直觀圖像證據(jù)。發(fā)現(xiàn)黑素細(xì)胞表面存在大量坑狀結(jié)

3、構(gòu)。證明此坑狀結(jié)構(gòu)為黑素小體胞吐后留下的有力證據(jù)。
　　方法：
　　從包皮組織中提純并培養(yǎng)MC及KC，對(duì)提純的MC分4組進(jìn)行培養(yǎng)，分別為空白對(duì)照組，α-MSH刺激組，PGE2刺激組，及與KC共培養(yǎng)組，4組均在培養(yǎng)的第3天給予戊二醛固定，分別按照相應(yīng)的AFM及ESEM標(biāo)本制作步驟進(jìn)行標(biāo)本制作，然后分別在AFM及ESEM下采集細(xì)胞表面形態(tài)的圖像，對(duì)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)進(jìn)行收集及整理，并運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)行單因素方差分析、LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)

4、據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　AFM及ESEM圖像均觀察到MC表面呈現(xiàn)大小較均勻的坑狀凹陷，樹突尾端較胞體表面的坑狀結(jié)構(gòu)明顯增多(P<0.05)。α-MSH刺激組、PGE2刺激組及與KC共培養(yǎng)組中黑素細(xì)胞表面的坑狀結(jié)構(gòu)較空白對(duì)照組明顯增多(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　通過(guò)各種刺激因子的作用，MC表面坑狀凹陷均相應(yīng)的增多。證明黑素細(xì)胞表面的坑狀結(jié)構(gòu)與黑素小體分泌作用密切相關(guān)，為證明黑素小體通過(guò)胞吐作用進(jìn)行分泌和傳