瘢痕組織TGF-β表達及與黑素細胞影響關系的研究.pdf

1、研究目的: 在病理性瘢痕的形成過程中，轉化生長因子-β（TGF-β）發(fā)揮著極其重要的作用，它可以促進成纖維細胞增殖和分泌大量的膠原，并導致膠原沉積和抑制其降解，延緩上皮化過程，促使病理性瘢痕的產(chǎn)生。 已有研究表明，抑制TGF-β的信號轉導就能有效抑制TGF-β的生物學效應，而TGF-β的信號轉導過程存在有多個可調(diào)控點，不同的蛋白分子參與其中。為此，本研究首先采用細胞和組織免疫化學的方法，檢測TGF-β及其信號轉導通路中的

2、Smad3、P-Smad2/3等蛋白分子在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚組織中的表達差異，并進行比較分析，以希望找到此信號通路中最為關鍵的調(diào)控點，為病理性瘢痕的機制和治療研究，提供一個新的切入點。 色素對病理性瘢痕形成的影響，一直以來報道甚少。但病理性瘢痕在不同膚色人群中的發(fā)生率差異明顯，在個體，黑素細胞分布情況不同的部位發(fā)生率也不一樣。本實驗建立了人黑素細胞和成纖維細胞的體外共培養(yǎng)模型，觀察共培養(yǎng)條件下的成纖維細胞，其在生長增

3、殖、膠原分泌、TGF-β1及其胞內(nèi)P-Smad2/3表達等方面的改變情況，為黑素細胞和瘢痕增生之間關系的研究，提供了一個新的思路。 研究方法: 1、用細胞免疫化學和熒光化學的方法檢測TGF-b1和Smad3在瘢痕疙瘩成纖維細胞內(nèi)的定位與表達情況。 2、用組織免疫化學技術檢測TGF-b1、Smad3和P-Smad2/3在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚組織中的表達差異性，并統(tǒng)計分析。 3、建立人黑素細胞和人成

4、纖維細胞的體外共培養(yǎng)模型，并用MTT、RT-PCR、免疫細胞化學等技術檢測共培養(yǎng)條件下的成纖維細胞，其生長和增殖能力、膠原的分泌、TGF-b1和P-Smad2/3表達水平的變化情況。 研究結果: 1、可見瘢痕疙瘩成纖維細胞內(nèi)TGF-b1和Smad3皆為陽性表達，均主要存在于細胞漿中。 2、可見TGF-b1、Smad3和P-Smad2/3在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚組織中有不同程度的表達，表達部位也不相同。

5、 3、可發(fā)現(xiàn)與黑素細胞共培養(yǎng)后的成纖維細胞，在增殖能力、膠原分泌、TGF-b1及P-Smad2/3的表達水平上都有顯著提高。 研究結論: 1、瘢痕疙瘩的成纖維細胞可檢測到TGF-b1和Smad3的陽性表達狀態(tài)。 2、P-Smad2/3在不同組織中的表達水平有顯著差異，一定程度上能反映瘢痕的病理性水平；TGF-b1在病理性瘢痕中表達量高，在正常皮膚中表達量很低。 3、黑素細胞可刺激成纖維細胞增殖和膠原的