鈾礦塵對巨噬細(xì)胞毒性作用及TGF-β1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討鈾礦塵作用小鼠巨噬細(xì)胞不同時(shí)間后的細(xì)胞毒性作用及鈾礦塵誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)TGF-β1的影響。
　　方法：采用小鼠巨噬細(xì)胞系 RAW264.7細(xì)胞株，進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)分別設(shè)鈾礦塵實(shí)驗(yàn)組和無粉塵培養(yǎng)基對照組。實(shí)驗(yàn)組用120μg/ml的鈾礦塵混懸液與RAW264.7細(xì)胞分別作用2、4、8、16、24、32h后，通過MTT實(shí)驗(yàn)、HE染色、AO/EB染色等方法觀察鈾礦塵對RAW264.7增殖活性、細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞凋亡的影響；

2、利用比色法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2及MDA水平的變化；應(yīng)用ELISA法測定鈾礦塵對RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1水平的影響。
　　結(jié)果：鈾礦塵混懸液作用RAW264.7細(xì)胞2、4、8、16、24、32h后，MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，RAW264.7細(xì)胞增殖活性明顯降低（與對照組比較，P＜0.05），并且隨著染塵時(shí)間的延長，RAW264.7細(xì)胞的存活率逐漸降低；HE染色可見，隨著染塵時(shí)間的延長，鈾礦塵組梭型或不規(guī)

3、則型細(xì)胞數(shù)目上升，多核細(xì)胞數(shù)明顯增加，細(xì)胞胞質(zhì)缺失，胞核外露、染色變淺，細(xì)胞形態(tài)變化較大；AO/EB染色發(fā)現(xiàn)，鈾礦塵組紅色或橙色的凋亡/壞死細(xì)胞明顯增多，并且隨著染塵時(shí)間的延長，壞死和凋亡細(xì)胞數(shù)目逐漸增加；比色法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2及MDA含量發(fā)現(xiàn)，鈾礦塵組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2、MDA水平明顯升高（與對照組比較，P＜0.05），并且隨著染塵時(shí)間的延長，其水平持續(xù)升高；ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，鈾礦塵能夠引起RA