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1、目的:
目前對(duì)于慢性輕度壓迫的脊髓型頸椎病尚缺乏理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)將新型慢性吸水膨脹性材料植入大鼠椎管而模擬脊髓型頸椎病的發(fā)病過(guò)程,進(jìn)而研究此模型中哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(The mammalian target of rapamycin,mTOR)表達(dá)與髓內(nèi)細(xì)胞凋亡,并探討mTOR與凋亡在脊髓損傷及修復(fù)過(guò)程中的作用。
方法:
將吸水膨脹性材料通過(guò)后路手術(shù)植入雄性 SD大鼠椎管內(nèi)并作為實(shí)驗(yàn)組,對(duì)
2、照組將材料植入后立即取出,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各15只大鼠。每日評(píng)測(cè)大鼠BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分。分別于術(shù)后1天、3天、7天、10天及14天對(duì)大鼠進(jìn)行MRI檢測(cè),然后處死大鼠,將脊髓制成組織切片。最后通過(guò)HE染色觀察組織細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;通過(guò)TUNEL染色觀察脊髓內(nèi)凋亡細(xì)胞數(shù)量;并通過(guò)免疫組化法檢測(cè)mTOR表達(dá)。
結(jié)果:
術(shù)后3天內(nèi)所有大鼠BBB評(píng)分恢復(fù)正常;MRI顯示隨著時(shí)間推移,脊髓受壓逐漸明顯,但水腫逐漸消退,切口瘢痕組織形
3、成,周?chē)浗M織輕度水腫,未見(jiàn)出血及脊髓軟化;HE染色顯示髓內(nèi)水腫,細(xì)胞空泡樣變,運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)量減少以后角更為明顯,各組大鼠脊髓受壓部位內(nèi)可見(jiàn)輕度炎性細(xì)胞浸潤(rùn);TUNEL染色顯示各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組大鼠脊髓內(nèi)凋亡細(xì)胞數(shù)目高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但實(shí)驗(yàn)組內(nèi)對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;免疫組化結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組中單位面積內(nèi)mTOR陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量呈先增高再降低的趨勢(shì),在7天時(shí)達(dá)到頂峰,且與其他實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組的單位面積內(nèi)mTOR
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