雷帕霉素對大鼠慢性移植腎腎病保護作用的研究.pdf

1、本文從以下幾方面進行論述：
　　第一部分:建立大鼠慢性移植腎腎病模型
　　目的:探討大鼠慢性移植腎腎病模型建立的方法和意義。
　　方法:將近交系雄性Fischer大鼠和Lewis大鼠，建立慢性移植腎腎病模型。分為對照組和實驗組，Lewis大鼠—Lewis大鼠同系對照組，F(xiàn)ischer大鼠—Lewis大鼠為異系移植組為實驗組。術(shù)后4周和8周獲取移植腎，檢測移植腎的病理變化。
　　結(jié)果:大鼠慢性移植腎腎病模型成功建立

2、，手術(shù)成功率75.0％。對照組術(shù)后4周和8周，移植腎未見明顯病理損害。實驗組術(shù)后4周，移植腎出現(xiàn)輕微的病理損害。到了術(shù)后第8周，移植腎出現(xiàn)明顯的間質(zhì)纖維化，小管萎縮，腎小球硬化，腎動脈硬化，為典型的慢性排斥反應(yīng)。
　　結(jié)論:建立Fischer大鼠—Lewis大鼠慢性移植腎腎病模型，可復(fù)制出類似人類慢性移植腎排斥反應(yīng)的病理變化，是一種理想的研究慢性排斥反應(yīng)的實驗?zāi)Ｐ汀?br>　　第二部分:雷帕霉素對慢性移植腎腎病保護作用的實驗研究<

3、br>　　目的:研究雷帕霉素對大鼠慢性移植腎腎病的保護作用及其機理。
　　方法:通過將Lewis大鼠或F344大鼠腎臟原位移植到Lewis大鼠，成功建立大鼠腎移植模型。受者分為三組:同系移植組，異系移植組，雷帕霉素組。移植術(shù)后4周和8周獲取移植物和血清。用HE染色和Masson染色檢測組織學表現(xiàn)，并檢測肌酐值。使用免疫組化和蛋白免疫印跡法檢測自噬相關(guān)分子LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62。另使用免疫熒光和電子顯微鏡進一步分析自噬

4、活動。
　　結(jié)果:雷帕霉素組肌酐值在腎移植術(shù)后的4周和8周均比異系移植對照組低，有顯著性差異(p＜0.05)，且兩組肌酐值均隨時間變化明顯升高(p＜0.05)。HE染色，Masson染色和Banff評分均發(fā)現(xiàn)移植術(shù)后4周和8周，雷帕霉素組組織學損傷更輕微。在雷帕霉素組，自噬相關(guān)因子LC3-Ⅱ和Beclin-1表達水平在移植術(shù)后4周和8周比同期異系移植組增高，p62表達水平則降低，均有顯著性差異(p＜0.05)。免疫熒光染色同樣發(fā)現(xiàn)