雷帕霉素對(duì)糖尿病腎病大鼠的療效觀察和機(jī)制研究.pdf

1、糖尿病腎病（DN）是慢性腎臟疾病的常見(jiàn)原因之一，是糖尿病的嚴(yán)重并發(fā)癥之一。目前關(guān)于DN的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，尚未完全闡明。晚近的研究證實(shí)VEGF和Ang/Tie-2系統(tǒng)在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。雷帕霉素（rapamycin）是一種新型的免疫抑制劑，越來(lái)越多的研究提示雷帕霉素靶分子(mammalian target ofRapamycin，mTOR)在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起重要的作用。 目的：（1）了解早期糖尿病大鼠腎功能改

2、變及腎臟血管新生因子表達(dá)的改變情況；（2）了解雷帕霉素對(duì)早期糖尿病腎病大鼠的療效，以探討早期糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展的可能機(jī)制。 方法雄性SD 大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（N組，n=9）、糖尿病對(duì)照組（D組，n=9）、雷帕霉素治療組（R組，n=9）和血管緊張素Ⅱ-1 型受體拮抗劑L158809 治療組（L組，n=5），采用一次性腹腔注射STZ 建立1 型糖尿病大鼠模型。模型成功12周后，R組和L組分別用雷帕霉素（2mg/kg/d）和L15

3、8809（30mg/kg/d）干預(yù)治療4周，然后分別留取大鼠血、尿和腎組織標(biāo)本，比較各組大鼠腎小球結(jié)構(gòu)和功能的改變，real-time PCR、Westernblotting和免疫組化方法分別檢測(cè)腎組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2（VEGFR2）、血管生成素（angiopoietins，Ang-1和Ang-2）和血管生成素受體（Tie-2）的

4、表達(dá)。 結(jié)果：雷帕霉素和L158809的治療對(duì)糖尿病大鼠的高血糖無(wú)影響，但可以顯著改善大鼠的尿白蛋白（1.37±0.23和1.39±0.45 vs3.58±0.36，P均<0.01.），雷帕霉素的治療還可以改善糖尿病大鼠的Ccr（1.76±0.42 vs2.10±0.16，P<0.05）。D組大鼠的VEGF mRNA和蛋白的表達(dá)、VEGFR2蛋白的表達(dá)均較N組升高、Ang-2 mRNA的表達(dá)和Tie-2蛋白的表達(dá)升高，經(jīng)雷帕霉素

5、和L158809 治療后VEGF mRNA（0.46±0.29和0.61±0.27 vs1.50±0.39，P均<0.01）和蛋白的表達(dá)（1.05±0.46和1.05±0.50 vs 1.98±0.39，P均<0.01）、VEGFR2蛋白的表達(dá)（10.14±0.86和10.25±0.94vs 18.40±1.26，P均< 0.01）、Ang-2 mRNA的表達(dá)（1.16±0.39和0.78±0.28 vs2.41±0.93，P均<0.0