鎘對(duì)血睪屏障相關(guān)蛋白表達(dá)水平和緊密連接超微結(jié)構(gòu)的影響及黃芪甲苷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:觀察黃芪甲苷和SB203580對(duì)鎘致大鼠血睪屏障破壞及相關(guān)蛋白表達(dá)改變的保護(hù)效應(yīng)，并初步探討黃芪甲苷的保護(hù)機(jī)制。
　　方法:21只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組:單純鎘組（0.1％氯化鎘腹腔內(nèi)注射，1mg/Kg·d），鎘加黃芪甲苷組（鎘劑量同上，同時(shí)注射黃芪甲苷，10mg/Kg·d），鎘加SB203580組（鎘劑量同上，同時(shí)注射SB203580，100μg/Kg·d），以上各組又分為連續(xù)處理五天和十天兩個(gè)時(shí)間組，對(duì)照組腹腔內(nèi)注

2、射等量生理鹽水。各實(shí)驗(yàn)和對(duì)照組動(dòng)物均為3只。取睪丸做H-E染色、免疫組織化學(xué)染色、血睪屏障超微結(jié)構(gòu)觀察以及Western bloting檢測(cè)p38MAPK磷酸化水平改變。
　　結(jié)果:H-E染色觀察對(duì)照組支持細(xì)胞核染色較淺且不規(guī)則，鎘組支持細(xì)胞內(nèi)有空泡形成，鎘加黃芪甲苷組與鎘加SB203580組未見明顯形態(tài)異常。免疫組織化學(xué)染色觀察對(duì)照組波形蛋白陽性產(chǎn)物在支持細(xì)胞基室腔附近的胞質(zhì)中表達(dá)，間隙連接蛋白43、閉鎖小帶-1蛋白、Claud

3、in-11陽性產(chǎn)物在生精上皮靠近基底部表達(dá)。鎘組波形蛋白、縫隙連接蛋白43、閉鎖小帶-1蛋白、Claudin-11陽性產(chǎn)物表達(dá)均顯著降低(P＜0.05)，鎘加黃芪甲苷組與鎘加SB203580組陽性產(chǎn)物表達(dá)雖低于對(duì)照組但明顯高于鎘組(P＜0.05)。超微結(jié)構(gòu)觀察對(duì)照組血睪屏障緊密連接形態(tài)完整，呈連續(xù)的電子密度較深致密線，鎘組血睪屏障緊密連接及支持細(xì)胞均見不同程度破壞，鎘加黃芪甲苷組與鎘加SB203580組破壞程度較相應(yīng)處理時(shí)間鎘組為輕。W

4、estern bloting結(jié)果顯示鎘組P-p38MAPK水平明顯增強(qiáng)(P＜0.05)，鎘加黃芪甲苷組與鎘加SB203580組P-p38MAPK水平雖高于對(duì)照組，但較鎘組明顯減弱(P＜0.05)。
　　結(jié)論:鎘致大鼠血睪屏障波形蛋白、間隙連接蛋白43、閉鎖小帶-1蛋白、Claudin-11表達(dá)水平降低，睪丸形態(tài)學(xué)、血睪屏障超微結(jié)構(gòu)損傷，黃芪甲苷和SB203580對(duì)鎘致大鼠血睪屏障破壞及相關(guān)蛋白表達(dá)改變具有保護(hù)作用，且保護(hù)作用與其抑