HPLC法測定禽血清和肌肉中恩諾沙星含量的方法改進(jìn)與應(yīng)用.pdf

1、隨著畜牧業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，部分養(yǎng)殖企業(yè)為防止動(dòng)物疾病的發(fā)生并追求畜禽的快速生產(chǎn)，長時(shí)期使用抗菌藥與添加劑已成為普遍現(xiàn)象，其中部分獸藥也用于人類或兩者結(jié)構(gòu)相似，若獸藥超劑量殘留于動(dòng)物源性食品中可能會(huì)對人類健康構(gòu)成一定威脅。
　　 氟喹諾酮類藥物(FLuoroquino Lones，F(xiàn)Qs)是新一代高效、廣譜抗菌藥，廣泛應(yīng)用于畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。恩諾沙星(EnrofLoxacin，ENR)是世界上第一個(gè)動(dòng)物專用的氟喹諾酮類藥物，具

2、有抗菌譜廣、殺菌活性強(qiáng)、體內(nèi)分布廣泛等特點(diǎn)，對預(yù)防和治療動(dòng)物細(xì)菌性疾病和支原體感染方面有較高療效，尤其是在防治肉雞沙門氏菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、巴氏桿菌和支原體等疾病上更為常用。持續(xù)低劑量使用會(huì)造成藥物原型及其代謝產(chǎn)物蓄積于食用組織，通過食物鏈進(jìn)入人體，輕者可以引起一些機(jī)體的過敏反應(yīng)，并且延遲和破壞正常菌群的生長，重者可導(dǎo)致食物中毒。此外，不同研究顯示長期低劑量使用獸藥可以導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性。
　　 測定血清中恩諾沙星含量是評價(jià)雞場

3、用藥情況的第一手材料，通過HPLC檢測血清中恩諾沙星的含量可以判斷養(yǎng)殖場是否遵守休藥期的規(guī)定，對比血清與肌肉中恩諾沙星含量可以分析肉中恩諾沙星的殘留與血液中恩諾沙星代謝的相關(guān)性。本研究通過優(yōu)化改進(jìn)HPLC法，檢測禽類血清和組織中恩諾沙星殘留含量，分析藥物在禽類體內(nèi)的消除規(guī)律，通過對比研究可以把動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)與畜產(chǎn)品藥物殘留有效地結(jié)合起來，對研究休藥期和控制畜產(chǎn)品藥物殘留有十分重要的意義。
　　 色譜條件:色譜柱(ODS-C18，

4、4.6 mm×150 mm，5μm);流動(dòng)相:0.5 mol/L磷酸/三乙胺溶液-乙腈(81∶19，v/v);柱溫:室溫25℃;檢測器:紫外檢測器2487;激發(fā)波長280nm，發(fā)射波長:450 nm;流速:1.0 mL/min;進(jìn)樣量:20μL
　　 結(jié)果表明恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.005-0.5μg/mL濃度范圍內(nèi)顯著相關(guān)。在0.025、0.05、0.1μg/g三個(gè)添加濃度下肉雞血清與肌肉空白樣品的回收率分別為80.4-92.3

5、％和79.2-92.3％;蛋雞血清與肌肉空白樣品的回收率分別為79.2-90.6％和78.4-90.0％;櫻桃谷鴨血清與肌肉空白樣品的回收率分別為82.4％-94.9％和80.4％-92.8％，變異系數(shù)均小于5％。
　　 該方法檢測條件穩(wěn)定，加標(biāo)回收率高，變異系數(shù)較小，可操作性強(qiáng)，應(yīng)用簡單方便，能使血清和肌肉中的藥物分離良好，沒有雜峰，最低檢測限小于10μg/kg，回收率均大于70％，RSD在14％以內(nèi)，符合組織樣品處理的真實(shí)度