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1、HPLC法測(cè)定藍(lán)莓中鞣花酸含量摘要摘要:目的目的建立藍(lán)莓提取物中鞣花酸含量的HPLC測(cè)定方法。方法方法色譜條件ODSHYPERSILC18柱(100mm4.6mm5μm)柱溫40℃用CH3OHEtOAcKH2PO4H3PO4(0.05molL)(體積比44∶2∶54)作為流動(dòng)相檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。結(jié)果結(jié)果鞣花酸在0.318~318.0μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系r=0.99902。平均加樣回收率為95.42%RSD為1.03%。
2、結(jié)論結(jié)論本方法精確可靠。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞:藍(lán)莓鞣花酸HPLCDeterminationofellagicacidintheextractsofLblueraspberrybyHPLCLIUYAN1SONGLiqiu1FANJunjuan2LIUHunayu2(1StardInfmationResearchInstituteofShenyangQualityTechnicalSupervisionBureauShenyang110161;2L
3、iaoningAgriculturalVocationTechnicalCollege,Yingkou115009)Abstract:TodeveloparapidsensitivehighperfmanceliquidchromatographicassayfdeterminationofellagicacidintheextractsofLblueraspberry.MethodChromatographywasperfmedona
4、ODSHYPERSILC18column(250mm4.6mm5μm)at254nm.Themobilephaseconsistedofamixtureofmethanolethylacetate0.05molLKH2PO4H3PO4(44∶2∶54)ataflowrateof1.0mlmin.ResultConclusionThelinearrangeofellagicacidwas0.318318.0μgwithacrelation
5、coefficientof0.99902.Theaveragerecoverywas95.42%RSD1.03%.ThemethodisaccuratereproducibleKeywds:Lblueraspberry.ellagicacidHPLC藍(lán)莓為多年生落葉或長(zhǎng)綠果樹(shù),是一種具有極高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的新興世界性小漿果果樹(shù),是越桔屬植物中營(yíng)養(yǎng)成分最豐富的類型,被聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)確定為人類五大健康食品之一。果實(shí)中大多含有特別豐富的、
6、有益于健康的氨基酸、蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、葉酸、鞣花酸、鞣花單寧、豐富的食用纖維、果糖、維生素C、維生素E、維生素A、SOD、熊果甙、花青甙、類黃酮及鉀、鐵、鋅、錳等微量元素。現(xiàn)已成為保健食品的良好原料。隨著我國(guó)人民生活水平的不斷提高,對(duì)保健食品的要求和希望越來(lái)越高,因此,加速藍(lán)莓的發(fā)展有著廣闊的前景,它將會(huì)成為21世紀(jì)的另一個(gè)新興產(chǎn)業(yè)。1.4樣品處理樣品處理精密稱取藍(lán)莓漿約0.6g加70%丙酮100mL浸漬約6h超聲處理30min
7、濾過(guò)殘?jiān)?0%丙酮30mL洗滌合并70%丙酮濾液和洗滌液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干丙酮溶液加50%的甲醇溶液100mL(內(nèi)含1.2molL的鹽酸及0.2g維生素C)90℃回流再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干,殘?jiān)枚讈嗧咳芙舛ㄈ萦?00mL量瓶中。精密吸取10mL于50mL量瓶中用二甲亞砜定容0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)作為供試品溶液[7]。1.5液相色譜分離條件液相色譜分離條件色譜柱:ODSHYPERSILC18(100mm46mm5μ);流速:1.0
8、mL/min;柱溫40℃;檢測(cè)波長(zhǎng):254nm;進(jìn)樣量:10μL;流動(dòng)相:流動(dòng)相為CH3OHEtOAcKH2PO4H3PO4(0.05molL)(體積比44∶2∶54)。1.6標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確稱取一定量的鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)品,加二甲亞砜溶解并稀釋定容,配制成鞣花酸的質(zhì)量濃度為0.318,3.18,63.6,159.0,318.0ugmL的工作溶液,用濾膜過(guò)濾,分別取10μl供高效液相色譜分析。每個(gè)濃度點(diǎn)進(jìn)樣3針。以色譜峰面積對(duì)鞣花酸的質(zhì)量濃
9、度作圖,得到鞣花酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.7回收率和重復(fù)性試驗(yàn)回收率和重復(fù)性試驗(yàn)稱取約0.6g勻漿后的藍(lán)莓漿樣品,分別向其中加入一定量的鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后再進(jìn)行浸漬、超聲提取、過(guò)濾洗滌、濃縮以及高效液相色譜分析。2.結(jié)果與分析結(jié)果與分析2.1結(jié)果結(jié)果2.1.1標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線以鞣花酸的色譜峰面積(A)對(duì)進(jìn)樣前鞣花酸的質(zhì)量濃度(C,μgmL)作圖,得到其標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性回歸方程為:A=112143.804C285.00109,線性相關(guān)系數(shù)為0.9
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