HPLC法測(cè)定轉(zhuǎn)化液中γ-氨基丁酸含量及轉(zhuǎn)化液的預(yù)處理研究.pdf

1、γ-氨基丁酸(GABA)轉(zhuǎn)化液是以谷氨酸為底物,以含谷氨酸脫羧酶的微生物細(xì)胞為催化劑反應(yīng)形成的多元混合體系。建立經(jīng)濟(jì)適用的獲得高純度GABA的后提取工藝,是關(guān)系到產(chǎn)品質(zhì)量和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的重要環(huán)節(jié)。GABA轉(zhuǎn)化液成分復(fù)雜,因此,提高預(yù)處理效率是提高產(chǎn)品質(zhì)量和降低成本的關(guān)鍵。本研究主要對(duì)GABA轉(zhuǎn)化液的預(yù)處理進(jìn)行研究,為后期的進(jìn)一步提取和精制奠定基礎(chǔ),同時(shí)建立了一種定量分析GABA的方法。主要結(jié)果包括:
　　 1、結(jié)合GABA轉(zhuǎn)化液特

2、點(diǎn),建立了以鄰苯二甲醛為衍生劑的柱前衍生反相色譜法。色譜條件為:Eclipse XDB-C18柱為分離柱,柱溫27℃,檢測(cè)波長(zhǎng)338nm,梯度洗脫。結(jié)果表明,該方法線性范圍為0.01 mmol/L-10.00 mmol/L,GABA出峰時(shí)間約為19.0 min時(shí),GABA與樣品中含有的谷氨酸及其它雜質(zhì)基本得到分離,而且乙醇和pH為3.0～8.0的轉(zhuǎn)化液均不會(huì)對(duì)GABA定量分析造成顯著影響。測(cè)得日內(nèi)精密度和日間精密度的保留時(shí)間RSD分別為

3、0.78％和0.72%,峰面積RSD分別為1.64%和1.24%。因此,該方法靈敏度高、重現(xiàn)性好,可用于轉(zhuǎn)化液中GABA含量的測(cè)定。
　　 2、脫色研究表明,活性白土對(duì)GABA轉(zhuǎn)化液的脫色效果較活性炭脫色好;最佳脫色條件為:活性白土加入量為2%,溫度為40℃,脫色處理20 min,轉(zhuǎn)化液維持原始pH;色素去除率為65.32%。3、超濾研究表明,處理GABA轉(zhuǎn)化液的最佳操作參數(shù)為:壓差0.2.Mpa,轉(zhuǎn)速65rpm,轉(zhuǎn)化液維持原始