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1、血管內(nèi)皮生長因子VEGF(Vascular Endothelial Growth Factor)是一類與肝素結(jié)合的生長因子,對血管內(nèi)皮細(xì)胞具特異的致分裂作用,可促使內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖.Flt-1基因全長7680bp,編碼區(qū)為4014bp,編碼1338個(gè)氨基酸.Flt-1由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)組成.從人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中提取得到總RNA,以其為模板,通過RT-PCR擴(kuò)增獲得編碼Flt-1胞外1~4結(jié)構(gòu)域的基因片段sFlt-1 cDNA,將s
2、Flt-1 cDNA片斷克隆至pUC18載體進(jìn)行測序.首先在鏈霉菌中進(jìn)行了sFlt-1的克隆表達(dá).收集不同時(shí)間重組菌的發(fā)酵上清進(jìn)行胞外分泌研究.本文是sFlt-1在鏈霉素菌中進(jìn)行外泌表達(dá)的首次報(bào)道.將sFlt-1基因片段插入甲醇酵母-大腸桿菌穿梭質(zhì)粒pPIC9K,構(gòu)建了重組質(zhì)粒pPIC9K-F,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到甲醇酵母Pichia pastoris GS115中,得到兩種表型的重組菌株P(guān).pastoris[pPIC9K-F].對其表達(dá)上
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