可溶性血管內(nèi)皮細胞生長抑制因子（VEGI）的克隆表達及功能研究.pdf

1、[目的](1)從人臍靜脈細胞中克隆VEGI<,251> cDNA的可溶性胞外區(qū)編碼基因VEGI<,72-251>,長度為540bp;(2)將VEGI<,72-251>基因在大腸桿菌中進行誘導表達,并對表達產(chǎn)物進行純化;(3)研究可溶性VEGI<,72-251>的生物學活性及其可能的作用機制;(4)可溶性VEGI<,72-251>和sVEGI<,174>的活性比較,分析可能的機制.[結論](1)VEGI<,72-251>胞外區(qū)在大腸桿菌中

2、以包涵體的形式獲得較高的表達,達菌體總蛋白的25.6﹪;(2)VEGI<,72-251>胞外區(qū)蛋白質經(jīng)純化后,純度達到94.5﹪.經(jīng)復性后具有明顯的生物學活性,可刺激T細胞IL-2和IFN<,γ>分泌增多;(3)VEGI<,72-251>與sVEGI<,174>的生物學活性不同:雖然VEGI<,72-251>胞外區(qū)C末端的約146個氨基酸與sVEGI<,174>相同,但VEGI<,72-251>不能抑制內(nèi)皮細胞的和雞胚絨毛尿囊膜的血管生

3、成,而sVEGI<,174>則不能激PBMC細胞IL-2分泌增多.蛋白質的氨基酸數(shù)量和增加或減少序列變化會改變蛋白質的空間結構,從而影響蛋白質與相應配、受體的結合,改變蛋白質的功能<'[24-26]>.推測VEGI<,72-251>與T細胞受體結合的結構位于其N端,N端增加的29個氨基酸殘基具有與T細胞結合的結構;而N端增加的氨基酸殘基掩蓋了C末端與內(nèi)皮細胞受體結合的結合部位,使VEGI<,72-251>失去了對內(nèi)皮細胞的作用.這些推測