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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文TACE基因膜外功能區(qū)在大腸桿菌中高水平表達(dá)和純化姓名:朱科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:楊渝珍2003.3.1華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)拉論文HighlevelexpressioninEcoilandpurificationoftheTACEectodomainAbstractobjective:TheprokaryoticexpressionvectorofhumanTACEecto
2、domainWBSconstructedTACEproteinwasexpressedhighlevelinEcoliandpurifiedBythisway,westudiedthereasonsthatinfluencedthehigh—levelandsolubleexpressioninEcoilandgainedthehighpuatyproteintolaythefoundationofproducingTACEantise
3、rumandselectinginhibitorsofTACEwithphagedisplaypeptidelibraryMethods:ThefusionexpressionvectorwasconstructedwiththeprokaryoticexpressionvectorincludingdisulfideisomerasedsbAgeneandtheTACEectodomainwhichhadbeenclonedbyour
4、lab,andexpressedinEcoilBL21(DE3)Theformofprotein(solubleorinclusionbody)WaSanalyzedbySDSPAGETheTACEproteinwaspurifiedwithNiresinResults:ThefusionproteinWaSexpressedhighlevelinEcoilBL21(19E3)afterinducedwithIPTGThefusionp
5、roteinexsitedmainlyininclusionbodyandthequantityofTACEfusionproteinwasabout372%ofthegrossproteinofbacterialTACEectodomainproteinwaspurifiedbytwowayswithNiresin,andthehighpurityproteinwasgainedCondusion:TheTACEectodomainw
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