抗CD3ε單克隆抗體和5-氟尿嘧啶對T淋巴細胞凋亡的協(xié)同作用.pdf

1、該研究首先發(fā)現(xiàn)采用預包被抗CD8抗體對JK、TJK和T3JK細胞進行34小時刺激后,僅有TJK細胞出現(xiàn)凋亡,使胞內caspase-3由未活化的形式生成活化的小片段,并有底物催化活性;伴隨TJK的細胞凋亡,其p53的表達顯著升高,而JK、T3JK細胞中則保持很低的水平,首次證明p53參與了TCR/CD3介導的T淋巴細胞凋亡信號途徑的調節(jié);同時發(fā)現(xiàn)Bcl-2蛋白家族成員Bid在抗CD8抗體刺激的TJK細胞凋亡時被活化,形成截短的tBid(t

2、runcated Bid),這種現(xiàn)象的發(fā)生一般和線粒體途徑相關,因此該實驗提示Bcl-2蛋白家族和線粒體可能參與了TCR/CD3介導的T淋巴白血病細胞凋亡的信號傳遞.由于TJK細胞中CD3ε-ITAM是完整的,JK、T3JK細胞中CD3ε-ITAM發(fā)生了突變,表明上述結果與CD3ε-ITAM的完整性相關,CD3ε-ITAM中的兩個酪氨酸在TCRP/CD3介導的信號傳遞中起關鍵作用,為進一步研究TCR/CD3復合物介導的細胞凋亡途徑及分子

3、機制奠定了基礎.該研究首次發(fā)現(xiàn)抗CD8單克隆抗體和5-氟尿嘧啶在刺激T淋巴白血病細胞凋亡時出現(xiàn)相似的細胞內效應,有相同的蛋白因子參與,提示二者在引起T淋巴白血病細胞凋亡的過程中可能具有協(xié)同作用,這一工作假設得到了進一步的實驗支持.我們將二者聯(lián)用刺激上述3株T淋巴白血病細胞株,結果表明二者聯(lián)用比單獨使用抗CD8抗體或5-FU時,細胞凋亡率、p53和NFκB表達、caspase-3和Bid活化等均顯著提高;使用caspase全抑制劑、cas

4、pase-3抑制劑、caspase-8抑制劑和caspase-9抑制劑都可以抑制抗CD8單體和5-氟尿嘧啶聯(lián)用引起的細胞凋亡,使細胞存活率增加,說明除了caspase-3外,caspase-8,-9等也參與了此凋亡信號傳遞途徑.該項研究表明抗CD8單克隆抗體和5-氟尿嘧啶在誘導T淋巴白血病細胞凋亡時具有協(xié)同作用,TCR/CD3抗原受體復合物介導的信號途徑與化學藥物介導的信號途徑中存在交叉點(Cross Talk)或共同通路,在理論上為進