組蛋白去乙酰化酶抑制劑延緩脂多糖誘導(dǎo)肺纖維化的作用及機(jī)制探討.pdf

1、內(nèi)毒素的主要成分脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）為引起急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）和肺纖維化的重要因素。LPS可以通過(guò)活化肺成纖維細(xì)胞組蛋白去乙?；福╤istone deacetylase，HDAC）而促進(jìn)肺成纖維細(xì)胞的異常增殖和活化，是肺纖維化發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。正丁酸為HDAC抑制劑，本研究旨在觀察正丁酸抑制 HDAC活化后對(duì) LPS刺激肺

2、纖維化進(jìn)程的影響及其機(jī)制，為 LPS誘導(dǎo)肺纖維化疾病防治手段的探討奠定理論基礎(chǔ)。
　　第一部分：組蛋白去乙酰化酶抑制劑延緩脂多糖誘導(dǎo)肺纖維化作用的評(píng)價(jià)
　　目的：觀察HDAC抑制劑正丁酸延緩LPS誘導(dǎo)肺纖維化過(guò)程的作用。
　　方法：將小鼠隨機(jī)化分為陰性對(duì)照組、LPS刺激組和正丁酸預(yù)處理+LPS刺激組。制模后2周及4周取小鼠肺組織，檢測(cè)各組肺組織HDAC活性；用蘇木素-伊紅（HE）染色和 Masson膠原染色鏡下觀察肺組

3、織炎癥和纖維化情況；并測(cè)定肺組織羥脯氨酸含量。
　　結(jié)果：與陰性對(duì)照組相比，腹腔注射 LPS后肺組織出現(xiàn)明顯的炎癥反應(yīng)和纖維化加重，羥脯氨酸含量增加，伴HDAC活化。與LPS刺激組相比，使用正丁酸可以延緩上述過(guò)程。
　　結(jié)論：LPS誘導(dǎo)肺組織纖維化過(guò)程與肺組織HDAC活化有關(guān)。HDAC抑制劑正丁酸能通過(guò)抑制HDAC活化，從而延緩由LPS誘導(dǎo)的肺纖維化過(guò)程。
　　第二部分：組蛋白去乙酰化酶抑制劑延緩脂多糖誘導(dǎo)肺纖維化作用

4、機(jī)制的探討
　　目的：明確HDAC抑制劑正丁酸延緩LPS誘導(dǎo)肺纖維化的機(jī)制。
　　方法：將小鼠隨機(jī)化分為L(zhǎng)PS刺激組和正丁酸預(yù)處理+LPS刺激組，并設(shè)陰性對(duì)照組，同樣在制模2周及4周后取小鼠肺組織，檢測(cè)各組肺組織乙?；M蛋白H3（Acetylated-histone H3，Ace-H3），乙?；M蛋白H4（Acetylated-histone H4，Ace-H4）和胸腺細(xì)胞分化抗原-1（thymocytedifferenti

5、ation antigen-1，Thy-1）及各組肺組織Thy-1mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果：與陰性對(duì)照組相比，腹腔注射 LPS后肺組織組蛋白 H3、H4乙?；潭冉档停琓hy-1基因及蛋白表達(dá)量降低。與LPS刺激組相比，使用正丁酸可以延緩上述過(guò)程。
　　結(jié)論：LPS誘導(dǎo)肺組織纖維化過(guò)程與組蛋白H3、H4去乙酰化過(guò)程以及Thy-1基因表達(dá)抑制相關(guān)。HDAC抑制劑正丁酸可以抑制組蛋白H4去乙?；^(guò)程，從而延緩由LPS誘導(dǎo)的T