黃瓜線粒體線狀質(zhì)粒pC4的鑒定、克隆及性質(zhì)研究.pdf

1、研究發(fā)現(xiàn),在多種高等植物線粒體中都存在有能自主復(fù)制的小分子DNA,稱之為線粒體DNA質(zhì)粒.作者選取了京津地區(qū)多個(gè)常見的水稻、玉米、豆類的品種進(jìn)行高等植物線粒體質(zhì)粒檢測,并著重檢測了多個(gè)黃瓜(Cucumis sativus)品種中的線粒體DNA質(zhì)粒.通過研究了質(zhì)粒在品種間的分布情況,研究人員在五種黃瓜和兩種玉米中分別發(fā)現(xiàn)了數(shù)量不等的線粒體DNA質(zhì)粒,并驗(yàn)證了線粒體質(zhì)粒的母性遺傳特性.還在前人基礎(chǔ)上結(jié)合本室情況摸索出一種簡便、快捷的植物線粒

2、體質(zhì)粒DNA提取方法.用電泳、酶切和電鏡觀察相結(jié)合的方法確定了pC4質(zhì)粒為線狀,pC1質(zhì)粒為環(huán)狀.然后,以津研四號(hào)為材料,回收、克隆了其線粒體線狀質(zhì)粒pC4.序列測定和分析發(fā)現(xiàn)了pC4質(zhì)粒長370bp,含多個(gè)正向和反向重復(fù)序列并有若干ORF讀碼框架.以克隆的pC4為探針,用Southern分子雜交的方法進(jìn)一步驗(yàn)證克隆的正確性并進(jìn)行pC4的同源性檢測.結(jié)果發(fā)現(xiàn)pC4質(zhì)粒與線粒體主環(huán)DNA、葉綠體DNA并無同源性,而與核DNA和津春二號(hào)、津