坎地沙坦西酯片人體藥動學(xué)和生物等效性及坎地沙坦吸收機制的研究.pdf

1、坎地沙坦(Candesartan,CDS)是一種新型的作用于腎素-醛固酮系統(tǒng)的抗高血壓藥物,它對血管緊張素Ⅱ1型受體有強親和力,可選擇性地阻斷該受體的作用,從而阻斷血管緊張素Ⅱ的血管收縮作用,減少醛固酮分泌,達到降壓效果。由于CDS口服吸收差,臨床應(yīng)用多為其前體藥物——坎地沙坦西酯(CandesartanCilexetil,CC),CC在胃腸道吸收過程中迅速完全轉(zhuǎn)化為CDS。CC用于治療原發(fā)性高血壓、心力衰竭、高血壓合并左心室肥厚、糖尿

2、病腎病等多種疾病,療效肯定。本課題建立了人血清中CDS的高效液相-熒光檢測(HPLC-Flu)方法,用該方法考察了中國健康男性志愿者口服8mgCC片后的藥動學(xué)參數(shù),并對兩種制劑的生物等效性進行了評價;另外還應(yīng)用Caco-2細胞模型和大鼠在體腸吸收模型對CDS的吸收機制進行了初步研究。
　　 課題的第一部分建立和驗證了HPLC-Fiu測定人血清中CDS濃度的方法。以萘普生為內(nèi)標(biāo)(I.S),血清用液.液萃取進行處理。色譜柱:YMC(

3、R)ODS柱(250mm×4.6mm,5μm);柱溫:30℃;流動相:10mmol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調(diào)pH為3.0):乙腈=60:40(V/V);流速:1.0mL/min;熒光檢測波長:激發(fā)波長270nm,發(fā)射波長390nm;進樣量:20μL。血清內(nèi)源性雜質(zhì)對樣品的測定沒有干擾。CDS與I.S的色譜保留時間分別為10.4min和16.5min。CDS在1.01～202ng·mL-1。范圍內(nèi)線性良好(r=0.9998),最低定量濃度

4、為1.01ng·mL-1。CDS的日內(nèi)、日間精密度和準(zhǔn)確度良好,樣品長期凍融(45天)和多次凍融(n=3)穩(wěn)定性良好。該方法快速、靈敏、準(zhǔn)確,可用于臨床藥動學(xué)及生物等效性研究。
　　 課題的第二部分考察了中國健康男性志愿者口服8mgCC片后的藥動學(xué)參數(shù),并對兩種制劑的生物等效性進行了評價。20名受試者隨機編號分為兩組,交叉口服給藥進行試驗,血樣測定采用第一部分建立的HPLC-Fiu法。結(jié)果顯示,20名健康男性志愿者單劑量口服CC

5、試驗片和參比片8mg后藥動學(xué)參數(shù)分別為:AUC0-1(ng·hr·mL-1):943.94±382.60和923.67±350.39;AUC10-∞(ng·hr·mL-1):979.72±380.41和967.95±353.61;Cmax(ng·mL-1):90.36±40.45和91.52±39.69;Tmax(h):3.98±1.26和4.13±0.60;t1/2(h):10.18±1.26和10.43±2.58。統(tǒng)計結(jié)果顯示:Tm

6、ax經(jīng)非參數(shù)統(tǒng)計(Wilcoxon檢驗),試驗制劑與參比制劑之間無顯著性差異;試驗片和參比片的AUC0～t,AUC0-∞和Cmax經(jīng)多因素方差分析(ANOVA)無顯著性差異。由雙單側(cè)t檢驗計算90％置信區(qū)間,試驗片AUC0-t的90％置信區(qū)間落在對照參比制劑的90.28％～113.90％范圍內(nèi),AUC0-∞的90％置信區(qū)間落在對照參比制劑的89.99％～112.25％范圍內(nèi),Cmax的90％置信區(qū)間落在對照參比制劑的86.03％～111

7、.07％范圍內(nèi),試驗制劑與參比制劑生物等效。本實驗得到的中國志愿者的藥動學(xué)參數(shù)與文獻報道的歐洲志愿者的參數(shù)基本吻合。CDS個體間藥動學(xué)差異較大。
　　 課題的第三部分考察了CDS在Caco-2細胞模型中的攝取及轉(zhuǎn)運機制。研究結(jié)果表明,CDS在Caco-2細胞中的攝取主要為被動擴散的方式:在pH6.0-8.0的介質(zhì)環(huán)境中,藥物的攝取和轉(zhuǎn)運無pH依賴性;不同濃度CDS的吸收表觀通透系數(shù)Papp平均值為(2.18×10-6)cm·se

8、c-1;加入P-糖蛋白(P-glycoprotein)抑制劑環(huán)孢素A和維拉帕米能顯著地提高CDS的吸收,同時降低CDS的分泌,表明CDS的吸收過程可能受到P-gp的外排作用。
　　 課題的第四部分考察了CDS在大鼠在體腸吸收模型中的吸收情況。結(jié)果顯示,CDS在大鼠不同腸斷(十二指腸、空腸、回腸)的吸收速率常數(shù)(Ka)和有效透皮系數(shù)(Peff)無顯著性差異,說明CDS無特殊的吸收窗;濃度范圍0.2～25μg·mL-1的CDS在空腸