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文檔簡(jiǎn)介
1、目的
1.檢測(cè)Tenascin-C在ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成過程中,不同時(shí)期(4、8、16、24、32w)表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化,探討其表達(dá)特性。
2.探討MR靶向探針anti-Tenascin-C-USPIO在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的特異性成像,為臨床動(dòng)脈粥樣硬化分子成像的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
材料和方法
1.取ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠50只,高脂飼料喂養(yǎng),建立小鼠動(dòng)脈粥樣硬化(A
2、S)模型,C57BL/6小鼠50只為同源對(duì)照組,普通飲食喂養(yǎng)。分別于喂養(yǎng)第4、8、16、24、32周(w)時(shí)處死小鼠,檢測(cè)血脂,顯微鏡觀察斑塊病理改變并進(jìn)行定量分析,免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)Tenascin-C的表達(dá)。
2.20只ApoE-/-小鼠予高脂飲食喂養(yǎng)建立動(dòng)脈粥樣硬化模型,將其分為靶向探針組10只,對(duì)照組10只,分別喂養(yǎng)至16、24w,探針組注射anti-Tenascin-C-USPIO,對(duì)照組注射單純
3、USPIO(n=5/組/周),于注射24h后進(jìn)行7.0T MR成像,檢測(cè)斑塊信號(hào)改變。成像后立刻取主動(dòng)脈標(biāo)本進(jìn)行Tenascin-C免疫組化染色,并行普魯士藍(lán)染色,觀察斑塊內(nèi)鐵沉積。
結(jié)果
1.模型組總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平均高于對(duì)照組(P均<0.05)。隨著造模時(shí)間的進(jìn)展,模型組斑塊面積及斑塊面積/管腔面積比值不斷增加,各時(shí)期比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。模型組斑塊內(nèi)Tenascin-C表
4、達(dá)量隨著AS進(jìn)展而升高,AS32w小鼠斑塊內(nèi)部Tenascin-C表達(dá)升高最顯著,高于8、16、24w小鼠(0.49±0.07 vs0.04±0.02,0.12±0.03,0.21±0.04,P<0.05)。
2.靶向探針組的斑塊信號(hào)改變率較對(duì)照組明顯降低(16w:-15.65±0.78% vs.-3.43±2.57%;24w:-26.38±1.54% vs.-11.12±1.60%,P<0.05)。并且在靶向探針組中,24w
5、時(shí)斑塊的信號(hào)改變率較16w亦明顯降低(P<0.05)。免疫組化染色顯示探針組Tenascin-C隨著斑塊進(jìn)展表達(dá)升高,與MR圖像斑塊信號(hào)改變程度相一致。普魯士藍(lán)染色顯示探針組斑塊內(nèi)較多藍(lán)染顆粒,而對(duì)照組則極少。
結(jié)論
1.Tenascin-C的表達(dá)量隨著斑塊進(jìn)展不斷增加,主要表達(dá)于脂核周圍及破裂的纖維帽中,Tenascin-C的表達(dá)水平變化可能與動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展及斑塊不穩(wěn)定性有關(guān)。
2.7.0T MR可以對(duì)
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