TSP-1、VEGF水平與糖尿病腎病患者內(nèi)皮功能障礙的關(guān)系.pdf

1、目的：糖尿病腎病(DN)是糖尿病(DM)最常見、最嚴(yán)重的慢性并發(fā)癥之一。在西方國家約有30％-40％的DM患者最終合并有DN，也是導(dǎo)致終末期腎臟疾病(ESRD)的重要原因。臨床上，DN早期表現(xiàn)是微量白蛋白尿，進(jìn)而表現(xiàn)為大量蛋白尿及腎小球濾過率的下降，最終發(fā)展至ESRD。多種因素參與了DN的發(fā)生和發(fā)展，但目前DN的確切發(fā)病機(jī)制尚未明了，對DN發(fā)病機(jī)制的探討一直是眾多學(xué)者關(guān)注的課題。最近研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮功能障礙與DM的血管并發(fā)癥有關(guān)。DM時

2、高血糖引起氧化應(yīng)激、炎癥和糖基化終末產(chǎn)物的過度產(chǎn)生均可促成血管內(nèi)皮損傷，在DN早期，氧化應(yīng)激、腎小球血流動力學(xué)變化等可以造成腎小球毛細(xì)血管袢功能和結(jié)構(gòu)的異常，引起內(nèi)皮損傷，進(jìn)而導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙，有助于DN的發(fā)展。目前認(rèn)為內(nèi)皮素-1/一氧化氮(ET-1/NO)的比值失衡標(biāo)志著血管內(nèi)皮功能障礙的存在，其特征是血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放的舒血管因子(NO)減少或(和)其生物活性的減低，內(nèi)皮依賴的縮血管因子(ET-1)增多，血管舒縮調(diào)節(jié)失調(diào)，使機(jī)體處于炎

3、癥應(yīng)激和高凝狀態(tài)中，造成多種不良后果。研究表明，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、維持血管內(nèi)皮完整性方面發(fā)揮重要作用，而血小板反應(yīng)蛋白-1(TSP-1)表達(dá)水平升高可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)其凋亡。本研究通過觀察DN患者內(nèi)皮功能障礙時VEGF和TSP-1水平的變化，以期進(jìn)一步了解在DN時其與血管內(nèi)皮功能障礙的關(guān)系及在DN進(jìn)展中的意義。
　　方法：
　　1.研究對象：共83例(男36例，女47例)，年齡在

4、34—74歲之間。分為：
　　正常對照組：選取2010年11月至2011年6月間在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院體檢證實血、尿常規(guī)，肝、腎功能，電解質(zhì)和血脂等檢查均正常的健康成人共18例(男8例，女10例)，平均年齡為51.28±8.75歲，均無急、慢性疾病史，亦無其他自身免疫性疾病或糖尿病家族遺傳史。
　　病人組：選取同時期在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腎內(nèi)科和內(nèi)分泌科住院及門診就診病人，符合DM診斷患者共65例(男28例，女37例)，病程

5、1～30年不等。進(jìn)一步分為：
　?、偬悄虿o血管并發(fā)癥組(DM組)：共22例(男9例，女13例)，平均年齡為53.09±9.00歲，經(jīng)眼底檢查、尿白蛋白排泄率檢查、部分難以確診患者行腎活檢病理學(xué)檢查，排除包括DN在內(nèi)的慢性血管并發(fā)癥。
　?、贒N早期組：共21例(男8例，女13例)，平均年齡為58.33±8.69歲，為尿白蛋白排泄率檢查結(jié)果在30-300mg/24h之間者。
　　③臨床DN組：共22例(男11例，女11

6、例)，平均年齡為56.35±9.94歲，為尿白蛋白排泄率檢查結(jié)果大于300mg/24h，伴或不伴有腎功能輕度異常的患者。收集各組病例年齡、體重指數(shù)(BMI)、血壓、血紅蛋白(Hb)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)等資料。
　　2.標(biāo)本采集：各組觀察對象空腹8-10h，抽取靜脈血5ml，分別收集于抗凝試管和無抗凝劑的真空試管中，兩個小時內(nèi)，4℃3000r/min離心10min，分離出血清或血漿，裝入EP管中，保存在-70℃冰箱內(nèi)

7、。
　　3.實驗方法：用放射免疫試劑盒測血漿ET-1濃度；硝酸還原酶法測血清NO濃度；酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA法)測血清VEGF和TSP-1濃度。
　　4.統(tǒng)計分析：采用SPSS13.0軟件處理數(shù)據(jù)，臨床指標(biāo)數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布用x-±s表示。正態(tài)分布數(shù)據(jù)兩兩比較采用t檢驗；多組間均數(shù)比較時，符合正態(tài)性分布且滿足方差齊性者采用單因素方差分析，組間差異采用SNK法；不符合正態(tài)性分布或方差不齊者采用Kruskal-wall

8、is H檢驗。正態(tài)分布的計量資料數(shù)據(jù)間直線相關(guān)關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析。取α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，以P<0.05代表有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.研究對象的一般資料：正常對照組、DM組、DN早期組和臨床DN組在年齡、BMI、收縮壓和舒張壓方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　2.研究對象的臨床資料：
　　2.1 尿白蛋白排泄率(UAE)：DM組、DN早期組和臨床DN組，檢測的UAE平均水平逐漸升

9、高。
　　2.2 糖化血紅蛋白(HbAlc)：與DM組相比，HbAlc水平在DN早期組和臨床DN組均升高，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　2.3 總膽固醇(CHO)、甘油三脂(TG)和血紅蛋白(Hb)：四組組間檢測差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　2.4 在肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)方面：正常對照組、DM組和DN早期組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，而臨床DN組兩項檢測結(jié)果較前三組均升高，

10、且與前三組組間差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.ET-1/NO水平：與正常對照組相比，ET-1水平在DM組，DN早期組及臨床DN組依次升高；NO水平與ET-1相反，為逐漸下降，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。ET-1水平與UAE呈高度正相關(guān)(γ=0.848，P<0.01)；NO水平與UAE呈高度負(fù)相關(guān)(γ=-0.727，P<0.01)。ET-1和NO兩指標(biāo)水平呈顯著負(fù)相關(guān)(γ=-0.912，P<0.01)。<

11、br>　　4.VEGF水平：與正常對照組相比，VEGF水平在DM組和DN早期組逐漸升高，三組間存在統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，且與UAE和ET-1呈正相關(guān)(γ=0.678和γ=0.857，P<0.01)，NO呈顯著負(fù)相關(guān)(γ=-0.906，P<0.01)；臨床DN組VEGF水平較DN早期組下降，兩組組間差異有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，與UAE呈負(fù)相關(guān)(γ=-0.570，P<0.05)。
　　5.TSP-1水平：與正常對照組相比，

12、TSP-1水平在DM組、DN早期組和臨床DN組逐漸升高，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。TSP-1水平分別與UAE及ET-1呈顯著正相關(guān)(γ=0.437和γ=0.640，P<0.01)；與NO呈顯著負(fù)相關(guān)(γ=-0.677，P<0.01)。
　　6.VEGF與TSP-1水平：臨床DN組患者血清VEGF和TSP-1水平呈負(fù)相關(guān)，γ=-0.433，P<0.05。
　　結(jié)論：
　　1.DM患者與健康人群相比ET-1水