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1、目的:觀察茶多酚(tea polyphenol,TP)對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞(Human periodontalligament fibroblasts cells,HPDLFs)增殖及其在牙根片上附著增殖的影響,摸索出茶多酚作用的最佳時(shí)間和濃度,并進(jìn)行大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型的相關(guān)研究,探討茶多酚對(duì)慢性牙周炎的作用機(jī)理,為臨床的進(jìn)一步研究及推廣,提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)原代HPDLFs并傳代,經(jīng)免疫組化SABC法檢
2、測(cè)角蛋白和波形絲蛋白鑒定,取4~6代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn);分組:實(shí)驗(yàn)組按TP濃度由低到高分為0.234375mg/ml組,0.31225mg/ml組,0.46875 mg/ml組,0.625mg/ml組,0.9375mg/ml組,1.25mg/ml組,1.875 mg/ml組,2.5mg/ml組,3.75 mg/ml組和5mg/ml組,共10個(gè)濃度組,及空白對(duì)照組,溶媒對(duì)照組和胰島素樣生長(zhǎng)因子(insulin-like growth facto
3、r-Ⅱ,IGF-Ⅱ)對(duì)照組;采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法、MTT法、掃描電鏡觀察等方法檢測(cè)TP對(duì)HPDLFs在牙根片上附著增值的影響。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用結(jié)扎絲結(jié)扎和高糖飲食法建立SD大鼠牙周炎模型,分組:實(shí)驗(yàn)組按TP不同濃度分為1.25mg/ml組,2.5mg/ml組,3.75 mg/ml組和5mg/ml組,生理鹽水對(duì)照組和甲硝唑?qū)φ战M,每個(gè)濃度組的動(dòng)物均為雌雄各3只,給藥采用牙齦區(qū)局部涂抹,每日3次,4周為1療程。對(duì)各組動(dòng)物行牙齦指數(shù)(GI)、探診深度(
4、PD)、牙齒動(dòng)度(TM)、牙槽骨吸收值的觀察,測(cè)定齦溝液的細(xì)菌含量,X線攝片及病理切片來觀測(cè)牙周組織的改變。 結(jié)果:MTT結(jié)果顯示不同濃度TP均促進(jìn)HPDLFs的附著增殖(P<0.05);溶媒對(duì)照組與空白對(duì)照組無明顯差異(P>0.05);相同作用時(shí)間下,5mg/ml TP對(duì)HPDLFs的作用較IGF顯著(P<0.01);TP最佳作用時(shí)間為6小時(shí),最佳濃度為5mg/ml。掃描電鏡結(jié)果顯示:在TP作用下,大部分HPDLFs在EDTA
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