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文檔簡(jiǎn)介
1、研究目的:
本實(shí)驗(yàn)的目的在于初步闡明茶多酚對(duì)原發(fā)性開(kāi)角型青光眼來(lái)源的小梁細(xì)胞有抗氧化損傷的作用。并為茶多酚在眼科其他領(lǐng)域的運(yùn)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
1、材料:復(fù)蘇后傳3-5代GTC置于DMEM應(yīng)用液,于5%CO2的37℃條件下培養(yǎng)。
2、實(shí)驗(yàn)分組:將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的GTC隨機(jī)分為4組,對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組1、2、3,其中實(shí)驗(yàn)組1、2、3分別添加濃度為5、10、20 mg/L的TP,對(duì)照組加入等量的DM
2、EM應(yīng)用液,加入TP培養(yǎng)24小時(shí)后,采用蛋白免疫印跡法即蛋白質(zhì)印跡雜交(Western blot法)測(cè)定各組小梁細(xì)胞胞色素C(Cytochromec,CytC)的釋放,采用熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)(Fluorescence quantitative PCR)測(cè)定各組小梁細(xì)胞復(fù)合物I信使核糖核酸(Complex I Messenger RNA, Complex ImRNA)的表達(dá)水平,采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定各組小梁細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率。
結(jié)
3、果:
1、TP對(duì)小梁細(xì)胞生長(zhǎng)的影響
與POAG組相比,各茶多酚組細(xì)胞凋亡率均降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);不同濃度的茶多酚組間隨著茶多酚濃度的增加,細(xì)胞凋亡率隨之下降,各濃度組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
2、Western blot法測(cè)定各組小粱細(xì)胞CytC的釋放
與POAG組相比,各茶多酚組CytC的釋放均降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);不同濃度茶多酚組間隨茶多
4、酚濃度增加CytC的釋放下降,各濃度組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
3、熒光定量PCR測(cè)定各組小梁細(xì)胞Complex I mRNA的表達(dá)水平
與對(duì)照組相比,各茶多酚組complex I mRNA表達(dá)均增加,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);不同濃度茶多酚組間隨茶多酚濃度增加complex I mRNA表達(dá)增加,各濃度組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
結(jié)論:
1、外源性茶多酚對(duì)
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