小分子熱激蛋白23和27上游序列在核苷酸水平上的個(gè)體差異比較.pdf

1、小分子熱激蛋白是生物體內(nèi)一類重要的脅迫蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)多種生理生化反應(yīng),并保護(hù)細(xì)胞使其在外界各種不良環(huán)境條件下(如高溫、干旱、藥物等)免于或降低受損.SHsps的表達(dá)調(diào)控分為基礎(chǔ)性表達(dá)調(diào)控以及誘導(dǎo)表達(dá)調(diào)控兩種.Shsps的上游調(diào)控序列對(duì)于蛋白表達(dá)是至關(guān)重要的,特別是起始位點(diǎn)上游的200bp片段.此調(diào)控序列可分為兩大部分:一部分是基因特異性的DNA序列,他們位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游特定的位置,被不同的轉(zhuǎn)錄或抑制因子所識(shí)別;另一部分是核心啟動(dòng)子

2、區(qū),一般包括TATA盒、起始位點(diǎn)區(qū)、下游啟動(dòng)子元件,所有的這些位點(diǎn)都被TFⅡD所識(shí)別.該文以黑腹果蠅(D.melanogaster)為實(shí)驗(yàn)材料,對(duì)hsp23和hsp27上游序列進(jìn)行個(gè)體差異分析,從而為脅迫反應(yīng)及壽命的個(gè)體差異提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),并逐一對(duì)這些序列元件及與其作用因子之間的關(guān)系對(duì)表達(dá)調(diào)控進(jìn)行說(shuō)明.通過(guò)對(duì)不同個(gè)體間hsp23和hsp27上游序列堿基差異的比較,分析堿基變異發(fā)生的位置及特點(diǎn),推測(cè)其對(duì)DNA的空間構(gòu)象及與作用

3、因子結(jié)合的可能變化,分析由此引起的在抵御外界不良環(huán)境以及壽命等方面的個(gè)體差異.該實(shí)驗(yàn)分別克隆了6個(gè)hsp23及5個(gè)hsp27不同個(gè)體的上游調(diào)控序列400bp和389bp.發(fā)現(xiàn)變異大多發(fā)生在TATA盒周圍,但TATA盒處卻是100％的一致,提示TATA盒在調(diào)控中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,而其周圍-10-+10區(qū)域就不是很關(guān)鍵.另外大部分是A→T或T→A的突變,說(shuō)明此突變不會(huì)對(duì)染色質(zhì)的構(gòu)型以及與調(diào)節(jié)因子的結(jié)合產(chǎn)生太大的影響.值得注意的是,有幾處