白杄花粉管微絲骨架介導(dǎo)信號傳導(dǎo)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、中國科學(xué)院植物研究所碩士學(xué)位論文白杄花粉管微絲骨架介導(dǎo)信號傳導(dǎo)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究姓名：陳艷梅申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：林金星20050401A b s t r a c tY a n m e iC h e nD i r e c t e d b yP r o f ．J i n x i n g L i nP o l l e nt u b ea sac a r r i e rt o d e l i v e rt h es p e r

2、 mt ot h eo v u l ed u r i n gt h ep r o c e s so fs e x u a lp l a n tr e p r o d u c t i o ni nh i g h e rp l a n t s ．P o l l e nt u b e g r o w t hi sh i g h l y p o l a r i z e da n da c t i n c y t o s k e l e t o

3、n d e p e n d e n t ，m o r e o v e r p o l l e n t u b e h a s b e c o m e a r e l a t i v e l yw e l l - c h a r a c t e r i z e d m o d e ls y s t e mi n w h i c ht o s t u d yc e l l —c e l l r e c o g n i t i o n ，i

4、n t r a —a n di n t e r c e l l u l a rs i g n a l i n gi nh i g h e rp l a n t s ．T oi n v e s t i g a t er o l e so f t h ea c t i nc y t o s k e l e t o ni n t h e g r o w t h o f p o l l e n t u b e o f P i c e a m e

5、 y e r i R e h d ．e t W i l s ．，w e u s e d a c t i np o l y m e r i z a t i o n i n h i b i t o r l a t r u n c u l i n B ( L A T B ) u n d e r q u a n t i t a t i v e l y c o n t r o l l e dc o n d i t i o n s t o p e

6、r t u r bt h e a c t i n c y t o s k e l e t o n a n d o b s e r v a t i o nw i t h l a s e r s c a n n i n gc o n f o c a lm i c r o s c o p e ．A t l o w c o n c e n t r a t i o n s ，L A T Bd e p o l y m e r i z e da c

7、t i nc y t o s k e l e t o ni n t h e g r o w i n gp o l l e n t u b e a n dt h i s r a p i d l y i n h i b i t e dt h e i r t i p g r o w t h ．P r o t e o m i ca p p r o a c hW a su s e dt oa n a l y s e p r o t e i ne

8、x p r e s s i o n p r o f i l ec h a n g e sd u r i n gt h ep o l l e nt u b e d e v e l o p m e n t w i t h d i s t u r b e d o r g a n i z a t i o n o f t h e a c t i n c y t o s k e l e t o n ．T w o - d i m e n s i o

9、n a l e l e c t r o p h o r e s i s d i s p l a y e d n e a r l y 5 0 0 C o o m a s s i e B r i l l i a n tB l u e - s t a i n e d p r o t e i n s p o t s ．A t o t a l o f 110 p r o t e i n s p o t s w e r e r e p r o d

10、u c i b l yd i f f e r e n t i a l l y d i s p l a y e da f t e r 2 8 h o u r so f L A T Bt r e a t m e n t ，a n d 3 5 d i f f e r e n t i a l l yd i s p l a y e d p r o t e i n s w e r e i d e n t i f i e d b y m a s s

11、s p e c t r o m e t r y ．A m o n g t h e i d e n t i f i e dp r o t e i n s ，i nc a s e o f18 p r o t e i n s p o t sa r eu p r e g u l a t e d u p o nt oL A T B t r e a t m e n t w h i l e17s p o t s a r e d o w n r e g

12、 u l a t e d ．T h e s e p r o t e i n s w e r e g r o u p e d i n t o d i s t i n c t f u n c t i o n a lc a t e g o r i e si n c l u d i n gp r o t e i n si n v o l v e d i n c a r b o h y d r a t em e t a b o l i s m ，

13、s t r e s s —r e s p o n s e ，s i g n a l i n g a n dc e l le x p a n s i o n ．S o m e o f t h e m a r e r e l e v a n tf o rt h ee n e r g ym e t a b o l i s mi nt h ec e l lw h i c h i sl i n k e d t ot h es i g n a l

14、—d e p e n d e n ta c t i nr e - o r g a n i z a t i o n ．I na d d i t i o n ，t w op r o t e i n s ( r e v e r s i b l y g l y c o s y l a t e d p o l y p e p t i d e 一1 a n d t y p e I l i a m e m b r a n e p r o t e i

15、ne p ·w a p 13 ) i d e n t i f i e di n t h i s s t u d yd e c r e a s e d s i g n i f i c a n t l y a n d a l m o s td i s a p p e a r e dw h e n t h ec o n c e n t r a t i o no fL A T Bi n c r e a s e dt o 5 0n M

16、．T h e s et w o p r o t e i n sf u n c t i o ni nc e l l w a l l p o l y s a c c h a r i d e b i o s y n t h e s i s ，w h i c h i n d i c a t e t h a t t h e a c t i n d i s r u p t i o ni n t e r f e r e sw i t hs e c r