基于NADPH氧化酶途徑的運(yùn)動(dòng)性蛋白尿機(jī)制研究.pdf

1、研究目的:
　　運(yùn)動(dòng)氧應(yīng)激是運(yùn)動(dòng)性蛋白尿產(chǎn)生的重要原因，但運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的腎臟活性氧的來源及其作用機(jī)制尚不清楚。以大鼠力竭性跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)為模型，并為大鼠尾部注射NADPH氧化酶抑制劑apocynin，研究運(yùn)動(dòng)性蛋白尿產(chǎn)生的機(jī)制。并根據(jù)力竭運(yùn)動(dòng)后大鼠腎組織形態(tài)和足細(xì)胞裂孔蛋白nephrin的變化，進(jìn)一步探索蛋白尿形成的機(jī)制。
　　研究方法:
　　實(shí)驗(yàn)一:
　　32只SD雄性大鼠隨機(jī)分為安靜對照組（C組）、對照+藥物組（CA組

2、）、力竭運(yùn)動(dòng)組（E組）、力竭運(yùn)動(dòng)+藥物組（EA組），每組8只。藥物注射按10mg/kg體重，每天一次，連續(xù)三天，并在EA組末次藥物注射一小時(shí)后進(jìn)行一次性力竭運(yùn)動(dòng)。測定運(yùn)動(dòng)后尿UP、血液BUN水平、腎臟ROS濃度、NOS活性、NOS與3-NT蛋白表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)二:
　　14只SD雄性大鼠隨機(jī)分為安靜對照組（C組）、力竭運(yùn)動(dòng)組（E組），每組七只。連續(xù)三天力竭性運(yùn)動(dòng)，以20m/min開始，坡度5％，5min;逐漸增加至24m/m

3、in，坡度10％，直到力竭。測定運(yùn)動(dòng)后尿UP、尿液尿酸、尿液葡萄糖、血液尿酸、血液葡糖糖、血BUN、腎臟ROS濃度、腎臟iNOS、3-NT、NOX4和nephrin蛋白表達(dá)、腎組織形態(tài)變化。
　　研究結(jié)果:
　　實(shí)驗(yàn)一:
　　(1)一次性力竭運(yùn)動(dòng)后，E組大鼠尿蛋白含量較C組相比有顯著性升高(P＜0.01)，EA組與E組相比下降明顯(P＜0.05)，E組、EA組血液BUN也顯著升高。
　　(2)一次性力竭運(yùn)動(dòng)后，E

4、組腎組織ROS生成量與C組相比明顯升高(P＜0.05)，EA組較E組ROS生成量亦顯著性降低(P＜0.05)。
　　(3)E組和EA組腎iNOS活性較C組明顯增高(P＜0.05)，而nNOS和eNOS的活性未見變化。同時(shí)，也僅見E組和EA組腎iNOS蛋白表達(dá)明顯增加(P＜0.05)，而nNOS和eNOS未見變化。
　　(4)E組較C組腎3-NT生成量顯著增高(P＜0.01)，而EA組與E組相比明顯降低(P＜0.05)。

5、>　　實(shí)驗(yàn)二:
　　(1)力竭運(yùn)動(dòng)后，E組大鼠尿液較C組相比尿蛋白(P＜0.01)、尿酸(P＜0.01)、尿糖(P＜0.05)含量明顯增高。
　　(2)力竭運(yùn)動(dòng)后，E組大鼠血清尿酸、血BUN水平明顯升高(P＜0.01)、血糖(P＜0.01)含量顯著性降低。
　　(3)力竭運(yùn)動(dòng)后，E組大鼠腎臟ROS較C組相比明顯身高(P＜0.01)。
　　(4)力竭運(yùn)動(dòng)后，E組大鼠腎組織iNOS、3-NT含量明顯升高(P＜0.01

6、)，nephrin蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.05)。
　　(5)腎組織蘇木精染色發(fā)現(xiàn)，C組大鼠腎小球形態(tài)正常均勻，排列規(guī)則，E組大鼠可見腎小球球體肥大，腎小球形態(tài)改變且分布減少，毛細(xì)血管基底膜增厚，系膜基質(zhì)增生。
　　研究結(jié)論:
　　(1)力竭運(yùn)動(dòng)可明顯增加大鼠尿蛋白、BUN、尿酸及尿液尿糖水平，同時(shí)降低血糖含量。
　　(2)力竭運(yùn)動(dòng)可明顯增加大鼠腎組織NADPH氧化酶活性，并產(chǎn)生大量O2-·，通過注射apocy

7、nin可明顯抑制該酶活性。
　　(3)力竭運(yùn)動(dòng)可明顯增加腎組織iNOS活性和蛋白表達(dá)。
　　(4)力竭運(yùn)動(dòng)后，腎組織3-NT表達(dá)明顯增高，推測是力竭運(yùn)動(dòng)所致NADPH氧化酶途徑的O2-.產(chǎn)生增加，大量的O2-.與NO反應(yīng)生成ONOO-。
　　(5)力竭運(yùn)動(dòng)可誘導(dǎo)腎組織足細(xì)胞裂孔蛋白nephrin蛋白表達(dá)減少，提示力竭運(yùn)動(dòng)可改變大鼠腎組織濾過結(jié)構(gòu)。
　　(6)顯微鏡觀察到力竭運(yùn)動(dòng)后大鼠腎組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損，濾過屏障受