3-MA對(duì)化療藥誘導(dǎo)NK-T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株凋亡作用的研究.pdf

1、目的：NK/T細(xì)胞淋巴瘤是一類(lèi)好發(fā)生于鼻部及其周?chē)M織的惡性度較高的淋巴瘤，該病患者預(yù)后較差，生存期比較短，對(duì)常規(guī)的化療方案敏感性較差，且易于復(fù)發(fā)。有效的化療仍有利于提高CR率，降低復(fù)發(fā)可能，特別是對(duì)于晚期患者和伴有鼻外病變的患者。目前傳統(tǒng)的化療方案常規(guī)治療的療效欠佳，需要探索更有效的藥物治療方案以提高治療的有效率，延長(zhǎng)患者的生存期。
　　方法:培養(yǎng)NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞，分組（A:長(zhǎng)春瑞濱+表柔比星+3-甲基腺嘌呤、B:長(zhǎng)春瑞濱

2、+表柔比星、C:長(zhǎng)春瑞濱+多柔比星+3-甲基腺嘌呤、D:長(zhǎng)春瑞濱+多柔比星、E:多西他賽+表柔比星+3-甲基腺嘌呤、F:多西他賽+表柔比星、G:多西他賽+多柔比星+3-甲基腺嘌呤、H:多西他賽+多柔比星、I:3-甲基腺嘌呤、J:細(xì)胞對(duì)照）加藥處理細(xì)胞，培養(yǎng)24小時(shí)后收集細(xì)胞，裂解細(xì)胞后提取細(xì)胞蛋白質(zhì)，進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡試驗(yàn)（免疫印跡試驗(yàn)），以β-肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)參照，應(yīng)用image J軟件分析灰度值，檢測(cè)自噬蛋白Beclin-1、LC3II表

3、達(dá)情況；收集不同藥物組作用24小時(shí)的細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，以研究自噬抑制劑聯(lián)合化療藥物對(duì)NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株的誘導(dǎo)凋亡作用，為NK/T細(xì)胞淋巴瘤臨床化療方案的選擇提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　結(jié)果：長(zhǎng)春瑞濱、多柔比星、多西他賽和表柔比星4種化療藥及自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤聯(lián)合方案處理NK/T細(xì)胞淋瘤細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)自噬蛋白表達(dá)的情況：化療藥物組高于細(xì)胞對(duì)照組，3-甲基腺嘌呤組低于細(xì)胞對(duì)照組，化療藥物組高于化療聯(lián)合3-MA組

4、，兩兩相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，細(xì)胞凋亡率的大小由高到低依次為：A、B、E、F、G、H、C、D、I、J，在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上，實(shí)驗(yàn)組的右象限(Q2、4)可見(jiàn)不同比例的凋亡細(xì)胞，與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：化療藥物作用于NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株，能引起瘤細(xì)胞的保護(hù)性自噬，自噬相關(guān)蛋白Beclin-1和LC3II表達(dá)增高；3-甲基腺嘌呤有效抑制NK/T細(xì)胞淋