AQP 5和CC16蛋白在大鼠失血性休克肺損傷中的表達(dá)及大黃附子湯干預(yù)作用的研究.pdf

1、目的：探討失血性休克復(fù)蘇后大鼠肺臟AQP5和CC16蛋白表達(dá)變化意義及大黃附子湯的作用機(jī)理。
　　方法：健康清潔級(jí)雄性SD大鼠，48只，隨機(jī)分為3組：對(duì)照組（假手術(shù)組）、模型組（失血性休克復(fù)蘇+生理鹽水灌腸組），治療組（失血性休克復(fù)蘇+大黃附子湯灌腸組），每組16只，休克1h對(duì)模型組和治療組進(jìn)行干預(yù)，再分為干預(yù)后12h、24h將每8只大鼠再分為一個(gè)亞組。對(duì)照組先進(jìn)行腹腔注射麻醉，然后依次在右頸總動(dòng)脈，左股動(dòng)脈和右股靜脈進(jìn)行插管操作

2、并全身肝素化，而不進(jìn)行失血性休克及復(fù)蘇的處理。模型組和治療組在對(duì)照組基礎(chǔ)上制備失血性休克及復(fù)蘇模型，以平均動(dòng)脈壓平穩(wěn)在100mmHg以上為復(fù)蘇成功。模型組和治療組在制模后12h、24h分別給予生理鹽水、大黃附子湯2ml保留灌腸，對(duì)照組不進(jìn)行任何操作。在各自時(shí)間點(diǎn)經(jīng)腹主動(dòng)脈取血，測(cè)定各組血漿內(nèi)毒素含量，并通過ELISA對(duì)水通道蛋白5（AQP5）及血漿克拉拉細(xì)胞蛋白（CC16）含量進(jìn)行檢測(cè)。動(dòng)物處死后，取左肺測(cè)濕/干重比，計(jì)算大鼠肺組織含水

3、量，用顯微鏡觀察并記錄，采用免疫組化法測(cè)定肺組織克拉拉細(xì)胞蛋白（CC16）和水通道蛋白5（AQP5）表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠血漿內(nèi)毒素含量：與對(duì)照組比較，模型組明顯較對(duì)照組高（P<0.01）。治療組與模型組比較，治療組血漿內(nèi)毒素含量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯減少（P<0.05）。
　　2.大鼠血漿克拉拉細(xì)胞蛋白（CC16）含量：模型組高于對(duì)照組。治療組與模型組比較，模型組血漿中CC16含量較治療組高（P<0.05）。<

4、br>　　3.大鼠肺組織勻漿水通道蛋白（AQP5含量）（ng/g）：與對(duì)照組比較,模型組大鼠AQP5含量均降低(P＜0.05)；與模型組比較,治療組（即大黃附子湯組）大鼠AQP5含量均升高(P＜0.05)
　　4.大鼠肺組織含水量（左肺濕/干比）檢測(cè)：治療組與模型組均高于對(duì)照組（P<0.05）。而模型組肺組織各個(gè)時(shí)間段含水量均高于治療組（P<0.05）。
　　5.HE染色光鏡觀察肺臟組織損傷：對(duì)照組肺泡結(jié)構(gòu)完整，肺泡囊清晰，

5、肺泡間隔正常。模型組肺泡間隔增寬，肺泡腔內(nèi)有明顯的出血滲出，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。治療組肺泡間隔清晰，肺泡腔內(nèi)的出血滲出以及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)顯著減輕，損傷評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。
　　6.肺組織克拉拉細(xì)胞蛋白（CC16）免疫組化及評(píng)分：在肺臟中，細(xì)胞漿呈棕黃色為陽性染色，即為大鼠肺臟克拉拉細(xì)胞蛋白（CC16）。對(duì)照組評(píng)分明顯高于模型組與治療組，治療組評(píng)分高于模型組（P<0.05）。
　　7.肺組織水通道蛋白5（AQP5）免