柿子單寧體內(nèi)外抗氧化活性及結構研究.pdf

1、本文以柿子為原料，選擇了適于分離純化柿子單寧的大孔樹脂；比較了不同聚合度柿子單寧的體內(nèi)外抗氧化活性；研究了柿子單寧（柿子單寧）對D-半乳糖(D-gal)誘導的氧化損傷的保護作用；探索了柿子單寧在體外體系中對低密度脂蛋白(LDL)氧化損傷的保護作用；對柿子單寧的結構特征進行了研究。研究結果如下：
　　 1.柿子單寧的大孔樹脂的選擇。
　　 為了選擇對柿子單寧純化性能較好的樹脂，對五種大孔樹脂進行了吸附與解吸實驗。通過靜態(tài)、

2、動態(tài)吸附試驗，比較了五種樹脂對柿子單寧的吸附量、吸附率、解吸率、使用次數(shù)等指標。結果表明，B型樹脂對柿子單寧具有吸附量大、易解吸、重復使用次數(shù)多、脫糖效果好等特點，是分離柿子單寧較理想的吸附樹脂。
　　 2.不同聚合度柿子單寧級分及柿子單寧的體外抗氧化作用。
　　 主要采用還原能力、清除羥基自由基能力、清除DPPH·及ABTS+·自由基的能力，以及對小鼠體外脂質(zhì)過氧化的抑制作用等方法對柿子單寧級分的抗氧化效果進行了綜合評

3、價。結果顯示，三個級分及柿子單寧在體外的各體系中均有很好的抗氧化效果，對體外脂質(zhì)過氧化有很好的抑制作用，且其抗氧化效果隨著聚合度增加而增強。
　　 3.柿子單寧及級分Ⅲ對溴苯誘導的急性氧化損傷的保護作用。
　　 溴苯模型的動物實驗結果表明，柿子單寧及聚合度高達33.6的級分Ⅲ在體內(nèi)可以防止由溴苯引發(fā)的血清及肝勻漿超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性的下降(P＜0.01)及丙二醛水平的上升(P＜

4、0.01)。兩者均有很好的抗氧化效果，其效果不遜于低聚體含量大于70％的葡萄籽原花青素。但總體而言，柿子單寧的抗氧化效果優(yōu)于級分Ⅲ。
　　 4.柿子單寧對D-gal誘導的衰老小鼠的認知障礙及氧化損傷的保護作用。
　　 實驗小鼠被分為六組，皮下注射D-gal或生理鹽水六周，劑量為150mg/kg；從第三周開始同時灌胃不同劑量的柿子單寧。六周試驗完成后，通過礦場試驗及水迷宮來觀察小鼠的行為學，通過海馬組織及皮膚組織切片來研究

5、細胞形態(tài)，同時檢測抗氧化酶（如SOD，CAT）的活性，非酶抗氧化劑（T-AOC，GSH等）的水平及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物(MDA)的生成量。結果顯示，柿子單寧能部分改善由D-半乳糖引起的意識損傷，防止海馬組織損傷，提高抗氧化能力，可能成為治療衰老相關疾病的一種新的手段。
　　 5.柿子單寧在體外對LDL氧化的保護作用。
　　 在LDL的氧化修飾體系中加入柿子單寧后，可以顯著延緩共軛二烯的形成、維持LDL的構象穩(wěn)定、抑制脂質(zhì)過氧化

6、產(chǎn)物的生成等。因此，柿子單寧在體外對LDL的氧化修飾具有很好的保護作用。
　　 6.柿子單寧的結構分析。
　　 對柿子單寧的結構研究表明，柿子單寧有著不同于其它水果單寧的獨特結構特點：①末端構成：Catechin(C)，epigallocatechin-3-O-gallate(EGCG)及楊梅素(myricetin)，延伸端結構為epicatechin(EC)，epigallocatechin(EGC)，EGCG，epi